ARA-290的生化研究

简述

ARA-290 中文名西比奈肽，是一种 11 个氨基酸组成的 EPO 衍生物多肽‌，用于神经系统疾病研究。ARA-290能增强内皮集落形成细胞的增殖、迁移等，除此之外，它还能有效防止血糖控制的逐渐恶化，发挥肾脏保护作用。

抑制糖尿病大鼠肾脏氧化应激反应研究

为了探讨促红细胞生成素(EPO)衍生肽ARA290能否抑制糖尿病大鼠肾脏氧化应激损伤，发挥肾脏保护作用。研究人员将链脲菌素腹腔注射制备糖尿病大鼠模型。将成模大鼠随机分为糖尿病模型组(DM组)，糖尿病模型+ARA290 50 U/kg治疗组(DA1组)和糖尿病模型+ARA290 100 U/kg治疗组(DA2组)，同时设立正常对照组(NC组)。药物干预12周后检测大鼠尿白蛋白/尿肌酐(ACR)，尿β2微球蛋白(β2-MG)。肾组织切片PAS染色，观察肾脏病理变化。免疫荧光，免疫共沉淀检测大鼠肾脏EPO受体(EPOR)，CD131的表达，实时荧光定量PCR和Western印迹检测大鼠肾脏NOX4表达，ELISA法检测大鼠肾脏活性氧(ROS)水平，免疫组化检测大鼠肾脏丙二醛(MDA)及8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)表达。 结果：免疫荧光检测显示大鼠肾脏表达EPOR，CD131，且两者存在共定位表达；免疫共沉淀显示EPOR，CD131在肾脏内存在相互结合；ARA290可降低糖尿病大鼠尿ACR，β2-MG，减轻糖尿病大鼠肾脏病理改变；ARA290可抑制糖尿病大鼠肾脏NOX4表达，降低肾脏ROS水平，减少肾脏MDA及8-OHdG表达。结论，大鼠肾脏表达EPOR和CD131，且两者在肾脏内存在相互结合，ARA290可能通过EPOR-CD131蛋白复合物介导抑制糖尿病大鼠肾脏氧化应激损伤，发挥肾脏保护作用^[1]。

促创面愈合研究

实验探讨促红细胞生成素(EPO)衍生肽ARA290对小鼠皮肤创面愈合的作用及机制，研究人员选用C57BL/6小鼠(SPF级)，在背部皮肤切创造模，分为PBS组，ARA290低剂量组(100μg/kg)和ARA290高剂量组(200μg/kg)，造模后每日创面周缘皮下注射100 μl PBS或ARA290。每日创面拍照，记录创面愈合率。RT-PCR检测创面TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10及TGF-β1表达，并用Tunel染色计算创面凋亡细胞数目。体外共培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7(RAW)和凋亡Jurkat细胞，流式细胞术检测巨噬细胞吞噬凋亡细胞的吞噬率；RT-PCR检测巨噬细胞TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10及TGF-β1的表达。结果，ARA290高剂量组创面愈合快于ARA290低剂量组和PBS组，ARA290低剂量组创面愈合快于PBS组；ARA290高剂量组创面TNF-α、IL-6及IL-1β表达低于PBS组，而IL-10和TGF-p1表达高于PBS组，且凋亡细胞数目少于PBS组。ARA290组巨噬细胞吞噬凋亡细胞的吞噬率高于PBS组，且巨噬细胞吞噬凋亡细胞后TNF-o、IL-6和IL-1β表达低于PBS组，IL-10和TGF-β1表达高于PBS组(P＜0.05)。故可得出结论：ARA290通过增强巨噬细胞胞葬功能减少创面凋亡细胞聚集和促炎因子表达，增加抑炎因子和生长因子表达，促进创面炎症消退和组织修复，加快皮肤创面愈合^[2]。

参考文献

[1]党建中,涂亚芳,王娟,等.ARA290抑制糖尿病大鼠肾脏氧化应激反应[J].肾脏病与透析肾移植杂志, 2019, 28(5):6.DOI:10.3969/j.issn.1006-298X.2019.05.007.

[2]陈宏,梁飞红,王佳薇,等.ARA290增强巨噬细胞胞葬功能促进小鼠皮肤创面愈合[J].免疫学杂志, 2022(038-007).DOI:10.13431/j.cnki.immunol.j.20220083.