8-异戊烯基柚皮素的作用

背景及概述^[1][2]

8-异戊烯基柚皮素(8-Prenylnaringenin，简称8PN)是啤酒花中发现的一种具有雌激素作用的异戊烯基黄酮，文献报道8PN是迄今为止发现的最具潜力的植物雌性激素。体内外研究表明8PN具有较强的雌激素作用，在低剂量下就能发挥功效，较已发现的大豆异黄酮、金雀异黄素等植物雌激素的作用都要强，可有效减缓妇女绝经期的各种症状，而且副作用弱，被认为是取代激素代替治疗法(Hormone Replacement Therapy，HRT)的一种新型植物雌性激素。除了雌激素作用外，8-异戊烯基柚皮素还具有预防癌症、防止骨质疏松、抑制血管增生、抗氧化等其他功效。

制备^[1]

8-异戊烯基柚皮素在实际生产中来源主要有两类，一类是直接提取法，另一类是化学合成法。酒花是8-异戊烯基柚皮素的主要来源，因此，早期8-异戊烯基柚皮素的制备大多采用从酒花中直接提取的方法获得。然而，8-异戊烯基柚皮素在酒花中的含量极低，据文献报道1kg酒花中仅含10-100mg。用直接提取法原料消耗量大，成本高，所得到的8-异戊烯基柚皮素杂质含量比较高，且不易除去，无法满足商业需要。

目前以异黄腐酚或柚皮素为底物，经过化学合成方法制备的8-异戊烯基柚皮素较多地应用于生产实践。化学合成法制备8PN效果较好，但存在操作复杂、污染大、安全性低、需要保护基团、专一性较差等缺点，这限制了其在实际中的应用。

CN201010592602.2提供了一种微生物细胞转化合成8-异戊烯基柚皮素的方法，利用爪哇正青霉将异黄腐酚经生物转化合成8-异戊烯基柚皮素，该方法具有操作简单、转化条件温和，效率高、安全性好、成本低等特点。本发明所使用的爪哇正青霉(Eupenicillium javanicum)购买于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，编号为CGMCC NO.3.5706。一种微生物细胞催化异黄腐酚合成8-异戊烯基柚皮素的方法，包括：

(1)向培养液中接入爪哇正青霉(Eupenicillium javanicum)CGMCC NO.3.5706，得到预反应体系；

(2)向步骤(1)得到的预反应体系中加入异黄腐酚溶液，于25-30℃，优选28℃，转化反应5-7天，优选6天，得到转化后的培养液；其中，异黄腐酚用量以每升培养液计为0.01-0.1g，优选0.02g；

(3)转化后的培养液经后处理得到8-异戊烯基柚皮素。

与现有技术相比，本发明具有如下优点：本发明方法能有效合成8-异戊烯基柚皮素，8-异戊烯基柚皮素转化率高，与现有的直接提取法或化学合成法相比，具有周期短、操作简便、易于控制、安全可靠、成本低廉、专一性好等特点，为工业化生产8-异戊烯基柚皮素提供了理论依据和技术前提，同时为解决8-异戊烯基柚皮素的工业化生产难题提供了新思路。

检测方法^[2]

一种同步检测啤酒花中黄腐酚、异黄腐酚和8-异戊烯基柚皮素的方法，包括步骤：

(1)待测样品的预处理：用有机溶剂提取含啤酒花的待测样品，过滤，所得滤液用有机溶剂定容，获得样品待测液；

(2)RP-HPLC-紫外检测：采用反相碳十八色谱柱和紫外可见分光检测器，流动相为乙腈和水相的混合溶液，流速为0.7ml/min～1.0ml/min，采用梯度洗脱，在双检测波长350nm～390nm和260nm～290nm分析样品待测液，得到样品待测液的色谱图；所述的水相为甲酸质量百分比浓度为0.5％～1.5％的甲酸水溶液。

(3)将样品待测液的色谱图上的峰面积在标准工作曲线上回归，计算样品待测液中黄腐酚、异黄腐酚和8-异戊烯基柚皮素的含量。

图1为黄腐酚浓度为40mg/L、异黄腐酚浓度为10mg/L且8-异戊烯基柚皮素浓度为10mg/L的混合标准待试液在370nm检测波长和288nm检测波长的高效液相色谱图；纵坐标：峰吸收强度，横坐标：保留时间(分钟)；图2为啤酒花提取物样品在370nm检测波长和288nm检测波长的高效液相色谱图；纵坐标：峰吸收强度，横坐标：保留时间(分钟)。

应用^[3]

CN201410460743.7提供一种主要含有黄腐酚、异黄腐酚、8-异戊烯基柚皮素、6-异戊烯基柚皮素、α-酸及β-酸的啤酒花天然药物组合物(以下简称啤酒花组合物)，该组合物是首次从桑科植物啤酒花中所获得；首次经进一步体外实验研究证明了本发明组合物具有抑制脂肪酶的活性，该组合物具有在制备抑制脂肪酶作用的药物中的新用途。

主要参考资料

[1] CN201010592602.2 微生物细胞催化异黄腐酚合成8-异戊烯基柚皮素的方法

[2] CN201010187676.8 同步检测啤酒花中黄腐酚、异黄腐酚和8-异戊烯基柚皮素的方法

[3]CN201410460743.7 啤酒花天然药物组合物的制备方法及新用途