一种2-(2-氯-1-亚乙基)酰肼甲酸甲酯纯度的检测方法

发布日期:2025/6/16 8:52:37

背景技术

阿瑞匹坦别名醋胺硝唑，是一种灰白色至淡黄色水晶般的固体化学品，化学名为5-[[(2R, 3S)-2-[(1R)-1-[3,5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)-4-吗啉基]甲基]-1,2-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮，临床上主要用于预防高度致吐性抗肿瘤化疗的初次和重复治疗过程中出现的急性和迟发性恶心和呕吐。2-(2-氯-1-亚乙基)酰肼甲酸甲酯，其CAS号为155742‑64‑6，它是生产阿瑞匹坦的重要中间体，2-(2-氯-1-亚乙基)酰肼甲酸甲酯的纯度、杂质含量直接影响阿瑞匹坦的纯度、杂质含量的大小，从而直接影响阿瑞匹坦的药物疗效。

2-(2-氯-1-亚乙基)酰肼甲酸甲酯

在制备阿瑞匹坦的过程中，2-(2-氯-1-亚乙基)酰肼甲酸甲酯的纯度及杂质含量的检测尤为重要，但现有技术中还未发现2‑(2‑氯‑1‑亚乙基)酰肼甲酸甲酯的纯度及杂质含量的检测方法的相关文献及报道。为了加强其质量控制，进一步控制阿瑞匹坦的质量，提供一种2‑(2‑氯‑1‑亚乙基)酰肼甲酸甲酯的纯度及杂质含量的检测方法尤为重要。

检测方法

空白试验为：将稀释液(稀释液为KH2PO4缓冲液和乙腈按照体积比为80:20的混合物，KH2PO4缓冲液的pH为3)以液相色谱进行检测，记录色谱图C；

将2‑(2‑氯‑1‑亚乙基)酰肼甲酸甲酯溶于稀释液(稀释液为KH2PO4缓冲液和乙腈按照体积比为80:20的混合物，KH2PO4缓冲液的pH为3)中，得到对照样品溶液，对照样品溶液中，2‑(2‑氯‑1‑亚乙基)酰肼甲酸甲酯的浓度为0.5mg/mL；

将含2‑(2‑氯‑1‑亚乙基)酰肼甲酸甲酯的待测样品1溶于稀释液中(稀释液为KH2PO4缓冲液和乙腈按照体积比为80:20的混合物，KH2PO4缓冲液的pH为3)，得到待测样品溶液，待测样品溶液中待测样品的浓度为0.5mg/mL；

取对照样品溶液，以液相色谱进行检测，记录色谱图A；取待测样品溶液，以液相色谱进行检测，记录色谱图B；根据色谱图A和色谱图B以及色谱图C计算待测样品中2‑(2‑氯‑1‑亚乙基)酰肼甲酸甲酯的纯度，采用面积归一化法计算待测样品1中2‑(2‑氯‑1‑亚乙基)酰肼甲酸甲酯的纯度及杂质含量，结果如下表所示；

2-(2-氯-1-亚乙基)酰肼甲酸甲酯检测结果表

液相色谱的条件包括：采用的流动相包括流动相A和流动相B；流动相A为KH2PO4缓冲液(KH2PO4缓冲液的浓度为0.02mol/L)和乙腈；流动相B为乙腈；流动相A中的KH2PO4缓冲液和乙腈的体积比为950:50；流动相的使用过程中，按照以下浓度梯度进行洗脱：0.01分钟，所述流动相中流动相A的体积占比100％；10分钟，所述流动相中流动相A的体积占比90％，流动相B的体积占比10％；20分钟，所述流动相中流动相A的体积占比80％，流动相B的体积占比20％；30分钟，所述流动相中流动相A的体积占比70％，流动相B的体积占比30％；40分钟以后，所述流动相中流动相A的体积占比100％；以液相色谱进行检测的过程中的流动相的流速为1mL/分钟；色谱柱为Inertsil ODS‑3V(4.6×250mm,5μm)；液相色谱仪的色谱柱温度为30℃；使用紫外检测器进行检测，检测波长为210nm；稀释液、2-(2-氯-1-亚乙基)酰肼甲酸甲酯对照样品溶液或待测样品溶液进入液相色谱仪中的用量为10μL。