10%的福尔马林溶液——病理科的关键试剂

在病理科，一例组织样本精准的检验结果，固定是至关重要的一步骤。医生常常把甲醛按照1:9的比例配置成10%的福尔马林溶液，因为甲醛水溶液渗透力强，固定均匀，对组织收缩较少，能保存脂类和类脂体，对脂肪、神经及髓鞘的固定效果很好。

福尔马林溶液随着时间和温度的变化，其浓度也会发生变化，温度低于-15℃，甲醛会出现明显的甲醛分解现象，放置时间长的甲醛溶液会有甲酸产生，使液体呈酸性，以上情况都会造成固定效果不佳问题，长期固定的组织也存在甲醛色素问题。

经过实践，10%中性福尔马林固定液（加入一定比例的磷酸氢二钠、磷酸二氢钠），其固定效果更佳，特别是对免疫组化、原位杂交、FISH、突变、PCR、二代测序等检查效果更优越，而且避免了甲醛色素的形成。

中性福尔马林固定液pH值控制要点

1、磷酸盐缓冲液的磷酸盐的浓度不能太高，也不能太低，建议用0.02mol的浓度为宜，此浓度的渗透压与细胞液和组织液的渗透压相近。

2、pH7.2~7.4磷酸盐缓冲液加福尔马林混匀放置12小时后，其pH值会下降0.3左右，有的会下降更多，与所用原料（福尔马林溶液）中的甲酸含量多少有关。

3、pH计建议选用三点式校正的并具有温度补偿的pH计， 测量前必须对p H计进行校正， 校正完毕后要验证校正是否到位。

4、pH计校正：一般选用pH4.0（邻苯二甲酸氢钾）、pH6.86（混合磷酸盐）、pH9.18（四硼酸钠）三用标准缓冲液（市面上用成品卖）来校正，校正过程必须按pH计的说明书规定进行，校正完毕后要验证校正是否到位。

5、验证校正是否到位：pH计的校正后，用蒸馏水冲洗，然后随意放入校正用的标准缓冲液中，比如放入pH6.86（混合磷酸盐）标准缓冲液中，此时pH计显示的值应在6.84~6.88之间，如放入pH4.0（邻苯二甲酸氢钾）标准缓冲液中，此时pH计显示的值应在3.98~4.02之间，如放入pH9.18（四硼酸钠）标准缓冲液中，此时pH计显示的值应在9.16~9.20之间，否则需重新校正pH计。

6、组织固定液测量时正确操作：用蒸馏水冲洗pH计（玻璃球部位）并用吸水纸吸尽水分，将pH计插入待测组织固定液中，轻轻振动pH计（约10秒钟），静置pH计，待pH计上的数值稳定（不跳动）后便读取其数字，此数字则是固定液的pH值。