OLIG1抗体的应用

背景^[1-3]

OLIG1抗体是一种用于研究OLIG1（Oligodendrocyte Lineage Transcription Factor 1）蛋白的抗体。OLIG1是少突胶质细胞谱系特异性基本螺旋-环-螺旋（bHLH）转录因子家族的一员，它在促进少突胶质细胞的形成和成熟中起着重要作用，尤其是在大脑中。OLIG1与OLIG2一起，在胚胎神经管中建立pMN域。

OLIG1抗体

OLIG1抗体可用于多种科学研究应用，包括Western Blot、免疫组织化学、免疫细胞化学等。不同供应商提供的OLIG1抗体在应用和物种反应性方面可能有所不同。以下是一些提供OLIG1抗体的供应商及其产品信息：

Cell Signaling Technology：提供Olig1(E3T6D)Rabbit mAb，这是一种重组单克隆抗体，适用于Western Blot、免疫组织化学和免疫细胞化学等应用。

Santa Cruz Biotechnology：提供OLIG1抗体（G-3），这是一种IgG1κ小鼠单克隆OLIG1抗体，适用于Western Blot、免疫沉淀、免疫荧光和ELISA，可检测小鼠、大鼠和人的OLIG1蛋白。

Thermo Fisher Scientific：提供OLIG1 Polyclonal Antibody(BS-8548R)，这是一种多克隆抗体，适用于Western Blot、免疫组化（石蜡和冷冻）、免疫细胞化学和ELISA。推荐的稀释比例如下：Western Blot 1:500-1:2,000，免疫组化（石蜡）1:100-1:500，免疫组化（冷冻）1:100-1:500，免疫细胞化学1:50-1:200，ELISA 1:500-1:1,000。

Abcam：提供Olig1重组抗体[EPR6790]，这是一种兔单克隆抗体，适用于流式细胞术（体内）和Western Blot。这种抗体与大鼠和人的OLIG1蛋白反应。

在使用OLIG1抗体时，应根据实验需求和所选抗体的说明书来调整稀释比例和实验步骤。不同抗体可能会有不同的最佳使用条件，因此在实验前仔细阅读抗体的使用说明非常重要。

应用^[4][5]

OLIG1抗体可以用于转录因子Olig1、Olig2与Id2、Id4在MBP转录调控中的作用

通过双分子荧光互补技术、转染技术和双荧光素酶检测系统，探讨转录因子Olig1、Olig2与Id2、Id4在MBP转录调节过程中的作用。

方法：（1）应用大鼠转录因子Olig1及Olig2的慢病毒载体pLenti6.3-Olig1-RFP，pLenti6.3-Olig2-GFP包装得到的病毒颗粒感染人胆囊癌GBC-SD细胞株，抗生素Blasticidin筛选出稳定表达大鼠转录因子Olig1及Olig2的人胆囊癌GBC-SD细胞株，免疫印迹法验证大鼠Olig1及Olig2的蛋白表达。（2）PCR克隆扩增大鼠MBP启动序列，构建MBP启动序列PGL3-basic荧光素酶报告载体，酶切测序鉴定。（3）应用pBiFC-VN173-Olig1、pBiFC-VN173-Olig2、pBiFC-VC155-Id2的BiFC真核表达载体，选择相应的两载体共转染入人胆囊癌GBC-SD细胞株，荧光显微镜下观察转录因子Olig1、Olig2与Id2之间的相互作用；应用脂质体法将大鼠MBP启动序列PGL3-basic荧光素酶载体与大鼠转录因子Id2、Id4的BiFC真核表达载体分别或共转染至OLIG1抗体检测稳定表达大鼠Olig1和Olig2的人GBC-SD细胞或不表达Olig1和Olig2的人GBC-SD细胞，通过检测荧光素酶相对活性，分析Olig1、Olig2与Id2、Id4在MBP转录调控中的作用。

OLIG1抗体结果：（1）成功获取稳定表达大鼠转录因子Olig1及Olig2的人GBC-SD细胞，免疫印迹法显示大鼠Olig1及Olig2蛋白高表达；（2）克隆出大鼠MBP启动序列，成功构建PGL3-basic-MBP启动序列荧光报告载体；（3）Olig1、Olig2与Id2的BiFC真核载体在靶细胞中能够高效表达，并可以相互结合出现BiFC荧光信号；双荧光素酶检测系统显示，在稳定表达大鼠Olig1、Olig2的GBC-SD细胞各个转染组中，与阴性对照组相比，大鼠PGL3-basic-MBP启动序列荧光素酶报告载体转染组的相对荧光素酶活性明显增高(p<0.01)；而大鼠Id2、Id4BiFC真核表达载体及大鼠PGL3-basic-MBP启动序列荧光素酶报告载体共转染组的荧光素酶相对活性较阴性对照增高(p<0.01)，但较上组明显降低(p<0.01)。结论：转录因子Olig1及Olig2能够有效地正性调节MBP启动序列，转录因子Id2、Id4通过与Olig1及Olig2直接结合抑制它们对MBP启动序列的调节作用。

参考文献

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[3]Identification of a Transcription Factor,BHLHB8,Involved in Mouse Seminal Vesicle Epithelium Differentiation and Function1[J].Christopher L.Pin;;Charis L.Johnson;;Bryan Rade;;Agnes S.Kowalik;;Victoria C.Garside;;Michelle E.Everest.Biology of Reproduction,2008

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[5]徐成岭.转录因子Olig1、Olig2与Id2、Id4在MBP转录调控中的作用[D].蚌埠医学院,2012.