提取穗花杉双黄酮化学对照品

背景技术

卷柏中含有多种黄酮类化合物，包括芹菜素、穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮和异柳杉素等。在很多种中草药如甘草、银杏叶、贯叶连翘中均存在。卷柏中穗花杉双黄酮的含量远远高于其他中草药。双黄酮类化合物具有抗菌性，能增进血液循环、控制皮炎、刺激毛发的生长、活血调理等功能。

穗花杉双黄酮分子式为C₃₀H₁₈O₁₀，分子量为538.46。熔点为256℃。淡黄色粉末，易溶于甲醇、乙醇和丙酮。穗花杉双黄酮为卷柏药材化学检验的对照品和质量控制的指标成分，具有多种生理活性，如抗肿瘤、抗炎、抗菌、血管舒张等。文献报道的穗花杉双黄酮制备方法是采用制备液相分离，成本较高，对仪器要求也较高。本文将采用相对优化的穗花杉双黄酮制备高纯度的化学对照品。

制备方法

使用中试规模的TD型中药提取装置(单批最大处理量20kg)提取药材。取卷柏药材50kg，用粉碎机粉碎成直径小于1cm的颗粒，分3次装入200L中药提取罐，每次16.7kg。加入160L95%乙醇，先浸泡12h，再在75℃下回流提取1.5h，残渣再用70%乙醇回流提取1h。提取液抽人真空浓缩罐，在50℃、真空度0.07MPa下回收溶剂，得到浸膏5.5kg。浸膏加少量温水混悬后，依次分别用石油醚、乙酸乙酯萃取直至水层溶液薄层色谱法(TLC)基本检测不到目标物，浓缩乙酸乙酯层得萃取物，萃取物上硅胶柱层析进行分离，乙酸乙酯萃取物用少量甲醇溶解，与等质量的160~200目硅胶拌匀、55℃烘干后分2次干法装入已压实的层析柱（30cm×35cm的不锈钢层析柱）。经过试验筛选，确定洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯-甲醇（50：10：1）。结合色带情况收集流分，收集液点板后合并有目标物的流分，减压回收溶剂后低温析出淡黄色沉淀，即为穗花杉双黄酮粗品。沉淀依次用适量脱水乙酸乙酯、甲醇超声溶解后过滤，各重复1次。经多次试验证明，丙酮为最佳重结晶溶剂。粗黄酮经脱水丙酮结晶、重结晶，55℃干燥后得淡黄色穗花杉双黄酮纯品。

参考文献

[1]刘朋朋,刘 勇,刘永刚,等. 卷柏中穗花杉双黄酮化学对照品的制备方法[J]. 中国药业,2012,21(13):12-13. DOI:10.3969/j.issn.1006-4931.2012.13.008.