癸酸钠抗性菌株的筛选助力产达托霉素的发酵

背景技术

癸酸钠又名十烷酸钠盐，CAS号：1002-62-6，分子式：C10H19NaO2，分子量：194.25，熔点：240°C (dec.)，储存条件：2-8°C，蒸汽压：0.00355mmHg at 25°C，溶解度：在水中的溶解度0.1g/mL，澄清，无色，是白色至浅黄色至浅橙色结晶粉末。

为提高达托霉素产生菌玫瑰孢链霉菌的发酵能力，通过筛选癸酸钠抗性菌株，优化其发酵瓶补加正癸酸的方法，提高达托霉素的摇瓶效价值。达托霉素是一种环状脂肽类抗生素，用于治疗革兰氏阳性感染，达托霉素由玫瑰孢链霉菌发酵产生，发酵代谢产物中活性最强的为A21978C，是一组包含不同长度脂酰侧链的环脂肽复合物，为达托霉素的母核，是由13个氨基酸组成的环十肽结构。A21978C含有许多组分，结构虽然相似，但抑菌活性和细胞毒性存在很大差异，其中达托霉素(A21978C)的治疗指数最高，在发酵过程中加入外源性前体癸酸，直接参与达托霉素的合成，可提高达托霉素在A21978C复合物中的比重。

方法与结果

癸酸钠抗性菌株筛选

当癸酸钠浓度小于0.4g/L时，菌体生长良好，随着癸酸钠浓度的增加，菌体生长情况变差，当癸酸钠浓度为1.2g/L时，对应的抗性平板内没有菌落生长，癸酸钠的最小抑制浓度为1.2g/L。同时观察到抗性平板上的菌落外观随着癸酸钠浓度的增加，由玫红色渐变为白色，生长速度随之变慢，菌落变小，菌落数随着浓度的增加变少。

选取癸酸钠浓度为0.2g/L及以上浓度的单菌落共568个进行摇瓶初筛验证，结果显示有32个单菌落效价值普遍高于对照组，对32个单菌落进行复筛摇瓶验证，摇瓶效价值最高为43.4mg/L，对应菌落号为TR21-29，作为补加正癸酸试验用菌株。

参考文献

[1]顾晶,石彦鹏,牛春,等. 癸酸钠抗性菌株产达托霉素的发酵补料策略[J]. 黑龙江农业科学,2022(4):81-84. DOI:10.11942/j.issn1002-2767.2022.04.0081.