高效液相色谱法测定水产品中的恶喹酸

背景技术

以恶喹酸为代表的喹诺酮类化合物是对革兰氏阴性菌和支原体具有广谱抗菌作用的药物，但在各种细胞培养过程中发现，恶喹酸对哺乳动物具有一定的毒性。近年来，许多国家规定了水产品中恶喹酸的最大残留量，如日本、韩国规定水产品中恶喹酸的最大残留量分别为50μg/kg、1μg/kg,我国规定水产品中恶喹酸的最大残留量为300μg/kg。日前，我国尚未制订恶喹酸残留量检验方法的国家标准，出入境检验检疫部门对水产品中恶喹酸残留量检验的依据一直引用行业标准SN0206-93，由于该方法的检出限为40μg/kg，且样品前处理繁琐，已不能满足日前检验工作的需要。我们对SN0206-93方法的样品前处理步骤和测定条件进行了优化，建立了新的测定水产品中恶喹酸残留量的高效液相色谱法。

检测方法

1、色谱条件

色谱柱：Hyperil型ODS柱(250mmx4.6mm，10μm)；流动相：0.002mol/L磷酸溶液-乙腈-四氢呋喃(体积比为65:20:15)，流速为1.0 mL/min；荧光检测器波长：激发波长为260nm，荧光波长为380nm；柱温：室温；进样量：50μL。

2、实验方法

将水产品去鳞、骨、内脏后，将所有可食部分充分搅碎、混匀。用四分法缩分出0.5kg作为样品。称取约5.0g(精确至0.1g)样品于玻璃研钵中，加入少量无水硫酸钠及海砂进行研磨，将60ml二氯甲烷分数次加入到玻璃研钵中，研磨，将样品溶液置于砂芯漏斗中，并进行抽滤，收集滤液于梨形烧瓶中，置于旋转蒸发仪上于40℃水浴中浓缩至近干。在残留物中加入30mL 1mol/L盐酸溶液，摇匀，转移至分液漏斗中，用正已烷提取两次(20mL/次)，振摇5min，分层后弃去正已烷层，再用二氯甲烷萃取两次(30mL/次)，将二氯甲烷萃取液过无水硫酸钠柱脱水，然后，在旋转蒸发仪上于40℃水浴中浓缩至干。准确加入1.0mL甲醇溶解残渣，用0.45μm滤膜过滤，上清液供液相色谱测定。恶喹酸的出峰保留时间约为5min。

参考文献

[1]郭德华,王敏,李芳. 高效液相色谱法测定水产品中的恶喹酸[J]. 化学分析计量,2003,12(1):24-25. DOI:10.3969/j.issn.1008-6145.2003.01.009.