检测稻米中直链淀粉的方法

表观直链淀粉

淀粉根据其化学结构可分为直链淀粉和枝链淀粉两种。直链淀粉能与碘在水溶液中生成稳定的复合物，此复合物内直链淀粉的6个葡萄糖基形成一个螺旋体，里面结合一个碘分子；其中的碘蓝度与直链淀粉含量高度相关。正是基于这个原理，早在1943年McCready和Hassid就提出碘蓝比色法测定水稻直链淀粉含量，用纯直、支链混标法做标样。随后1958年，Williams 报道在碱性条件下用590 nm 碘比色法测定脱脂直链淀粉含量，并改为用马铃薯直链淀粉做标样，但该方法中碘在碱性溶液中不稳定，结果重现性差。1971年，Sowbhagya和Bhattacharya 建议调整溶液的pH至8.0，从而提高结果的重复性。同年，国际水稻研究所的Juliano提出了“简化法”，此法不同于“Williams”法，一是波长提高到620 nm，二是样品不经脱脂处理，三是用乙酸溶液调介质至酸性，结果的重现性较好且测定步骤少，但由于枝链淀粉中的长链B也会结合碘而显色，枝链淀粉对直链淀粉含量的影响很难消除，因此这方法测定的直链淀粉含量后被定义为表观直链淀粉含量。

绝对直链淀粉含量与稻米品质

长期以来，稻米表观直链淀粉含量曾被认为是决定稻米蒸煮食味品质的关键指标之一，直链淀粉含量较高的稻米，其米饭硬而蓬松；反之则软而粘。但随育成品种遗传组成的多样化，表观直链淀粉含量相似（尤其是中高直链淀粉含量）而米饭质地相去甚远的现象日益普遍。因此，绝对直链淀粉含量指标的重要性也日益凹显。绝对直链淀粉的测定是由液相色谱或凝胶渗透色谱仪（GPC）测定，样品前处理步骤复杂，要经过样品脱脂去蛋白，后要糊化，异淀粉酶去分枝化等处理，样品上机测定时间也较长，这样品前处理的成本和仪器的费用均较高，因此作为实验室常规测定有较大的难度，很难推广应用。

进展

为了解决目前对直链淀粉含量的测定存在的比较复杂且成本较高的问题，专利 CN104833671B 提供了一种稻米绝对直链淀粉含量的测定方法。该方法通过四个不同含量梯度的标准样品制备和标定，配制实验用试剂，标准样品和待测样品的制备和糊化，标准样品和待测样品的碘蓝显色和分光光度计比色，并根据标准样品的吸光值和绝对直链淀粉含量所获得的线性方程来计算待测样品的绝对直链淀粉含量。具有简便，快速，准确，低成本和高效等优势，在水稻品质测定和育种早世代筛选中具有良好的应用前景。