东莨菪甙的应用及制备

背景及概述^[1][2]

山莨菪为多年生茄科草本植物，我国较常用藏药品种之一。东莨菪甙属香豆素类物质，具有抗真菌、抑制树木腐烂的作用，同时还具有抑制单胺氧化酶、抗炎、祛风、止痛、祛痰解痉、抗肿瘤等活性。目前，东莨菪甙已经在医药领域获得了广泛的应用。市场上能够生产东莨菪甙常见的中药材有很多，但这些植物大多数能够提取的东莨菪甙的含量并不高，目前由于提取东莨菪甙成本及技术受到限制，大量生产东莨菪甙仍然面临较多困难。

结构

应用^[1,3]

东莨菪甙是东莨菪内酯的糖基化产物，是一种香豆素类化合物。香豆素类化合物广泛存在于植物界中，是一类应用价值很高的次生代谢产物，以伞形科植物如防风、旋花科植物如丁公藤以及芸香科植物多为常见。东莨菪甙也是丁公藤类重要中药材的特征成分。在医学上东莨菪甙具有消炎止痛、抗骨质疏松、抗肿瘤、抗氧化、抗病毒、抗菌、降压及抗心律失常等多方面活性。在临床上有杀菌、抗肿瘤、抗炎及抗凝血等多种药理活性。在农业上，具有调节植物生长、杀虫、杀螨及抑菌等活性。

东莨菪甙结构上属于香豆素糖苷类化合物，其在旋花科、茄科和伞形科植物中的含量较高。现有的研究发现，东莨菪甙具有降血糖、抗风湿以及抗氧化等药理活性。药理实验证明：东莨菪甙可显著抑制LPS诱导的小胶质细胞炎症介质NO、ROS、TNF-α和IL-1β的释放，具有显著的抑制神经炎症活性。因此，该化合物可用于制备预防和/或治疗神经炎症以及相关的中枢神经退行性疾病的药物，具有较高的临床应用价值和开发前景。

制备^[1-2]

方法1：一种山莨菪根中东莨菪甙单体的制备方法，包括以下步骤：

1）山莨菪根经粉碎、过10~80目筛后，得到山莨菪根粉；

2）将所述山莨菪根粉用质量浓度为20~95%的乙醇溶液提取，经过滤得到滤液，该滤液经减压浓缩得浸膏；所述山莨菪根粉与所述乙醇溶液的质量体积比为1：10~1：30；

3）将所述浸膏用其质量的2~10倍去离子水溶解，并用正丁醇萃取，得到萃取液；

4）所述萃取液上非极性大孔树脂，先用去离子水洗脱，然后用2~15倍床层体积、质量浓度为10~60%的乙醇溶液洗脱，得到含有东莨菪甙的洗脱液；

5）所述洗脱液经减压浓缩后，得到东莨菪甙粗提物，该东莨菪甙粗提物先用其质量的2~5倍甲醇溶解，然后上硅胶柱，再用1~5倍床体积的氯仿/甲醇混合溶液进行洗脱，得到纯化的东莨菪甙洗脱液；

6）所述纯化的东莨菪甙洗脱液用半制备液相色谱仪制备，经减压干燥至恒重，即得白色粉末状东莨菪甙单体。

方法2：提取栽培烟草中东莨菪内酯和东莨菪甙的方法；

1）将处理过的栽培烟草叶片取样，称取重量，并在液氮中保存。

2）在液氮中充分研磨样品至粉末状。

3）加入1mL含有1000ng/ml 4-methylumbelliferone的70％methanol，震荡10min后，12000rpm离心20min，吸取上清液，放置4℃准备测定。

经过对照水处理栽培烟草叶片后，处理1天和3天植物体内的东莨菪内酯和东莨菪甙的含量均几乎为0mg/L，经茉莉酸甲酯和乙烯利处理后，植物体内东莨菪内酯的含量在1天和3天均没有明显变化，而东莨菪甙的含量在1天和3天均有大幅升高，并且幼嫩叶片(0leaf)及老叶片(1leaf)均能够被诱导出大量的东莨菪甙，幼嫩叶片(0leaf)及老叶片(1leaf)在处理1天后检测东莨菪甙含量分别为0.322mg/g和0.358mg/g，幼嫩叶片(0leaf)及老叶片(1leaf)在处理3天后检测东莨菪甙含量约为0.442mg/g和0.682mg/g。结果显示，经低浓度茉莉酸甲酯和乙烯利处理栽培烟草叶片后，能够大量诱导东莨菪甙产生。为工业化大量生产东莨菪甙提供了一种高效安全的新方法。

主要参考资料

[1] CN201210066768.X一种山莨菪根中东莨菪甙单体的制备方法

[2] CN201811181141.2 一种诱导烟草生产东莨菪甙的方法

[3] CN201810044371.8 东莨菪甙在制备抑制神经炎症药物中的应用