野百合碱的药效学及制备

背景及概述^[1][2]

野百合碱属吡咯里西丁类生物碱，又称猪屎豆碱、农吉利甲素、野百合胺、乌沙拉明，为吡咯西丁二醇和二元酸形成的环酯，是一种大环二酯型双稠吡咯啶类生物碱。野百合碱为中强碱性生物碱，是白色棱柱结晶，不溶于石油醚，微溶于苯或水，略溶于乙醚或丙酮，可溶于无水乙醇或甲醇，易溶于氯仿。 野百合碱对小鼠肉瘤-180、白血病L615、大鼠瓦克癌-256等均有一定的抑制作用（接种后24小时开始治疗），其中以对瓦克癌-256疗效最为显著。另有报告，对S37抑制率为54～75%。如在野百合碱母核氮原子上引入氧原子，毒性可降低，但对肉瘤-180的抑制率亦随之降低。临床试用于皮肤癌及子宫癌有较好的疗效，对白血病亦有一定效果。此生物碱为双稠吡咯啶类，其抗癌作用与烷化剂相似。

结构

药效学^[3]

本品对多种肿瘤有抑制作用，属烷化剂，通过对DNA的烃化作用而发挥抗癌效应。其主要用于皮肤癌的局部治疗，也用于基底细胞癌、宫颈癌、阴茎癌及白血病等。

药动学^[3]

给药后主要分布于肝、肾、胃等器官组织，24h大部分药物从尿中以原型排出体外，在肝脏中存留时间较长。

毒性机制^[1]

在双稠吡咯啶类化合物的结构中，双稠吡咯啶环1，2位的双键、伯羟基酯化的烯丙酯基团是抗肿瘤的活性部位，肝毒性生物碱的特点是1，2位双键存在于双稠吡咯啶环上，而在酯酰基的α位上，常带有位阻较大的基团，因此其抗癌作用和肝脏毒性是分不开的。如果l，2位双键饱和，即失去烯丙酯基团，在消除肝毒性的同时，也失去了抗癌活性。

研究发现，农吉利甲素单体对肺无作用，而离体灌注农吉利甲素代谢物后则能产生肺毒性的化学物质，这也就为农吉利甲素代谢物产生肺毒性提供了直接证据。农吉利甲素在红细胞中的保留表明，红细胞可能是将农吉利甲素代谢物运到其它器官的运载体，这可能是导致肺毒性的一个因素。吉利甲素引发肺动脉高压与一氧化氮的低生物利用度有关。因此，实验人员先给大鼠服用农吉利甲素和L精氨酸（一氧化氮的前导物），两星期后评估一氧化氮合酶信使RNA、内皮型一氧化氮合酶蛋白、环鸟甘酸和巯基化平（氧化应激指示剂）。

结果表明，农吉利甲素不改变内皮型一氧化氮合酶信使RNA或内皮型一氧化氮合酶蛋白在肺部的表达，而导致巯基化水平降低。因此，低巯基化水平可能是导致一氧化氮活性减弱和低环鸟甘酸水平的原因。继而表明，氧化应激可能是农吉利甲素导致肺动脉高压的一个因素。

制备 ^[4]

一种野百合碱的提取、纯化方法通过以下技术方案来实现：

1）原材料的处理：取干燥的野百合粉碎，过20-60目筛；

2）酶解：称取一定量的粗粉，加入料液比为1：2~5、70~90%的乙醇浸泡，并加入粗粉重量0.1%~0.3%的生物酶在pH值4~5，温度为45~50℃的条件下浸泡酶解1~3h；

3）超声提取：酶解结束，将步骤（2）中的酶解物进行超声提取1~2h，过滤，收集滤液，滤渣重复提取1~2次；

4）有机溶剂萃取：收集提取液减压浓缩至原体积的1/5~1/3，收集浓缩液，依次加入浓缩液体积1/3、1/4、1/6的氯仿搅拌，静置分层，弃去上层，收集下层，合并萃取液；

5）高速逆流色谱仪纯化：萃取液采用高速逆流色谱纯化，根据图谱收集目标成分，回收试剂，冷冻干燥即得野百合碱。

主要参考资料

[1] 农吉利的研究进展

[2] 从野百合种子中提取野百合碱的研究

[3]  实用处方及非处方药物大全

[4] CN201510270112.3 一种野百合碱的提取、纯化方法