细胞角蛋白19抗体的应用

背景^[1-3]

细胞角蛋白19抗体是一类可以特异性结合细胞角蛋白19的多克隆抗体，主要用于体外检测细胞角蛋白19的免疫学实验。

细胞角蛋白19抗体CK19是一种多功能细胞因子，既可由淋巴细胞产生，也能由非淋巴细胞合成。在体内免疫反应调节、血细胞的增生、防御机制和急性期反应中起重要作用。

细胞角蛋白19（CYFRA21-1）细胞角蛋白是细胞体的中间丝，根据其分子量和等电点不同可分为20种不同类型，其中细胞角蛋白19在肺癌诊断中有很大价值，是非小细胞肺癌的重要标志物，其为一种相对分子量40 000、等电点5.2的酸性蛋白，主要分布在单层和假复层上皮细胞。

细胞角蛋白19抗体免疫组化图

在肺癌的血清浓度阈值为2.2μg/L，其敏感性、特异性及准确性分别为57.7%、91.9%和64.9%。从组织学角度看，鳞癌的敏感性(76．5%)较腺癌(47．8%)为高，也高于SCC对两者的诊断率。细胞角蛋白19与CEA联合应用，诊断非小细胞肺癌符合率已可达到78%。在宫颈癌、膀胱癌、乳腺癌也有一定的阳性率，有报道称33%的慢性肾功能衰竭患者CYFRA21-1升高。

应用^[4][5]

细胞角蛋白19抗体可以用于细胞角蛋白18、19在HBV感染慢性肝脏疾病中的表达研究

比较乙型肝炎病毒(HBV)感染慢性肝脏疾病不同阶段患者血清细胞角蛋白18(CK18)片段即M30和M65的水平,评价二者在HBV感染慢性肝脏疾病诊断和分期中的应用价值,并进一步探讨HBV慢性感染过程和肝细胞癌(HCC)形成过程中的肝脏损害方式;比较血清CK19片段抗原(CYFRA21-1)在HBV感染慢性肝脏疾病不同阶段的表达,并评价CK19单项和联合诊断HCC的效能。以期为临床HBV感染慢性肝脏疾病的诊断和分期提供新的非创伤性指标。

方法:1.收集慢性HBV携带者、CHB患者、乙型肝炎肝硬化患者、乙肝后肝癌患者、CHB合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者的临床资料,并以同期健康体检者为对照,用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定上述研究对象的血清CK18(M30、M65)水平,分析其在不同组间及组内是否存在差异;通过M30和M65的相关性研究,探讨HBV慢性感染过程和HCC形成过程中的肝脏损害方式;分别将M30、M65与临床常用肝损伤检测指标进行相关性分析,评价二者在HBV感染慢性肝脏疾病诊断和分期中的应用价值。

2. 用酶联免疫吸附定量法测定CHB患者、LC患者、HCC患者和健康对照者的血清CK19片段抗原(CYFRA21-1),比较其在各组间的差异;并通过绘制ROC曲线评价CK19单项和与AFP联合诊断HCC的曲线下面积,比较诊断的敏感度和特异度,并确定出诊断HCC的临界值。

结果:1.HBV携带组的M30、M65水平较健康对照组无差异,CHB组、LC组和HCC组的M30、M65水平和阳性率高于HBV携带组和对照组。

2.CHB合并NAFLD组的M30、M65水平较CHB组无差异；

3.组内分析示,中重度CHB患者的M30水平和阳性率高于轻度CHB患者,中晚期HCC患者的M30和M65水平高于早期HCC患者。

4.在HBV感染慢性肝脏疾病过程中,血清CK18-M30和M65呈高度正相关(r=0.803,P<0.01)。

5.HBV感染慢性肝病患者的血清M30水平与ALT、AST、GGT、ALP、TBIL、AFP呈正相关(P<0.01),与Alb呈负相关(P<0.05),并受GGT和AST的独立影响。M65水平与ALT、AST、GGT、ALP、TBIL、AFP呈正相关(P<0.05),与Alb呈负相关(P<0.05),并受TBIL、GGT的独立影响。

6.健康对照组、CHB组、LC组、HCC组的CK19检出率分别为8%,8%,26%,48%(P<0.01),失代偿期LC患者的CK19检出率较代偿期LC者高。

7.CK19、AFP及二者联合诊断HCC的ROC曲线下面积分别为0.668,0.785,0.829。CK19临界值取0.360 ng/mL时,诊断的敏感度和特异度分别为48%和84%;AFP临界值取81.935 ng/mL,诊断的敏感度和特异度分别为62%和87%;CK19和AFP联合诊断HCC的敏感度和特异度分别为68%和89%。

参考文献

[1]Limited value of plasma cytokeratin-18 as a biomarker for NASH and fibrosis in patients with non-alcoholic fatty liver disease[J].Kenneth Cusi;;Zhi Chang;;Steve Harrison;;Romina Lomonaco;;Fernando Bril;;Beverly Orsak;;Carolina Ortiz-Lopez;;Joan Hecht;;Ariel E.Feldstein;;Amy Webb;;Christopher Louden;;Martin Goros;;Fermin Tio.Journal of Hepatology,2014(1)

[2]Caspase-cleaved fragments of cytokeratin-18 as a marker of inflammatory activity in chronic hepatitis B virus infection[J].Chang Bum Bae;;Soon Sun Kim;;Seun Joo Ahn;;Hyo Jung Cho;;Sei Rhan Kim;;Sun Young Park;;Ga Won Song;;Dong Joon Kim;;Seong Gyu Hwang;;Jin Mo Yang;;Young Bae Kim;;Young Nyun Park;;Sung Jae Shin;;Sung Won Cho;;Jae Youn Cheong.Journal of Clinical Virology,2013(4)

[3]Correlation analysis of nuclear morphology,cytokeratin and Ki‐67 expression of urothelial carcinoma cells[J].Masayo Shuto;;Kenji Warigaya;;Hiroshi Watanabe;;Michio Shimizu;;Toshio Fukuda;;Shin‐ichi Murata.Pathol Int,2013(6)

[4]Noninvasive Methods to Assess Liver Disease in Patients With Hepatitis B or C[J].Laurent Castera.Gastroenterology,2012(6)

[5]韩雪.细胞角蛋白18、19在HBV感染慢性肝脏疾病中的表达[D].天津医科大学,2015.