去甲异波尔定的提取方法

背景及概述^[1][2]

去甲异波尔定属于苄基异喹啉生物碱，它是中药材乌药中的主要药效成分之一， 研究表明，去甲异波尔定有很多的药理活性，特别是针对关节炎具有很好的疗效。乌药中化学成分主要有倍半萜及内酯、异喹啉生物碱等，其中异喹啉类生物碱具有广泛的生理活性，具有抗菌、抗肿瘤、镇痛、抗心律失常、抗血小板聚集、降压、调节免疫等功能，同时副作用较小，具有很高的开发利用价值。去甲异波尔定是乌药中的主要异喹啉生物碱，不仅具有体外抗氧化作用，还可用于治疗自身免疫性疾病，如：多肌炎、慢性活动性肝炎、混合性结缔组织病、原发性胆汁性肝硬变、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性噬中性白细胞减少症、狼疮性肾炎、慢性萎缩性胃炎、自身免疫性不育、子宫内膜异位症等疾病，在临床上具有重要应用价值。

提取方法^[1]

一、CN201810828166.0提供了一种利用高速逆流色谱分离乌药中去甲异波尔定的方法，以实现高效率、简便、快速的从乌药中分离去甲异波尔定的技术效果。具体包括如下步骤：

(1)制备乌药粗提取液：将乌药经过蒸馏水浸泡、浸提、过滤和离心分离过程，得到乌药粗提取液；

(2)初步纯化：利用大孔吸附树脂柱，依次使用蒸馏水和质量浓度为70％的乙醇对上述制备得到的乌药粗提取液进行洗脱，得到的乙醇洗脱液经过浓缩、冷冻干燥后得到乌药粗提取物；

(3)分离纯化乌药粗提取物：利用高速逆流色谱对上述乌药粗提取物进行分离提纯，得到去甲异波尔定。

二、CN201810122172.4提供一种联合应用超临界CO₂ 萃取和离子液体选择性提取制备去甲异波尔定的技术方法。该方法选取乌药块根为原料，首先采用超临界CO₂除去乌药中的脂溶性成分，然后选用合适的离子液体提取制备去甲异 波尔定。该方法克服了以往方法提取率较低、提取物杂质较多等问题，该方法具有高效、简单、绿色环保、成本较低、适合一定规模化生产的优点。所述的一种去甲异波尔定高效提取的方法，其特征在于包括以下工艺步骤：

（1）脱脂：将已经粉碎过筛的乌药块根粉投入超临界CO₂萃取装置中进行超临界CO₂萃取，提取结束后从萃取装置中获得乌药萃余物，从分离釜接收瓶得到萃取物；

（2）提取：将以上超临界物CO₂乌药萃余物加入离子液体水溶液，超声辅助提取，得到提取液，提取液过滤得到滤液和固体物料；

（3）萃取：将离子液体提取滤液加入有机溶剂萃取，静置分层，获得上层有机相萃取液和下层水液，将上层有机萃取液减压浓缩，即得去甲异波尔定。

根据本发明的方法，利用超临界CO₂去除乌药块根中的脂溶性成分，而充分利用了离子液体可设计性，筛选出了离子液体1-丁基-3-甲基咪唑溴盐用于高效提取去甲异波尔定。与2015版药典上所采用的甲醇-盐酸回流方法提取乌药去甲异波尔定的得率相比较，该方法所得去甲异波尔定相对提取率可以达到100%以上，同时纯度大于70%，可极大简化后续 纯化工艺步骤，利于大规模生产；同时，所用离子液体通过合适方法可以再次循环使用。该方法是一种去甲异波尔定成分高效提取制备的新工艺，所得去甲异波尔定提取率高、纯度品质较高，离子液体可以循环使用，操作方便，且工艺绿色环保，具有良好的推广应用前景。

图1是本发明去甲异波尔定的HPLC 图谱；保留时间12.1分钟色谱峰为去甲异波尔定。

临床应用和适应症^[4]

CN200810156212.3公开了去甲异波尔定的医药新用途，即其可用于制备治疗自身免疫性疾病药物的应用。所述自身免疫性疾病如：类风湿关节炎、多发性硬化症、系统红斑狼疮、多发性硬化症、I型糖尿病、银屑病、溃疡性结肠炎、Sjogren综合征、硬皮病、多肌炎、慢性活动性肝炎、混合性结缔组织病、原发性胆汁性肝硬变、自身免疫性溶血性贫血、桥本甲状腺炎、Addisons病、白斑、Graves病、重症肌无力、强直性脊柱炎、变应性骨关节炎、变应性血管炎、自身免疫性噬中性白细胞减少症、特发性血小板减少性紫癜、狼疮性肾炎、慢性萎缩性胃炎、自身免疫性不育、子宫内膜异位症、pasture病、天疱疮、盘状狼疮或致密沉积物等疾病。

主要参考资料

[1] CN201810828166.0 一种从乌药中分离去甲异波尔定的方法

[2] CN201810122172.4 一种去甲异波尔定高效提取的方法

[3] CN201510469607.9 一种去甲异波尔定自微乳制剂及其制备方法

[4] CN200810156212.3去甲异波尔定在制备治疗自身免疫性疾病药物中的应用