利克飞龙的应用

背景及概述^[1][2]

非甾体抗炎药（non-steroidal anti-inflammatorydrugs，NSAIDs）广泛用于解热、镇痛和关节炎的治疗，但其对长期服药患者的胃肠道、心血管系统和肾脏的不良反应。尽管NSAIDs 有这些不良反应，在我国治疗关节炎的3 大类药物中，NSAIDs 一直是治疗各种关节炎、多种发热和疼痛的主要药物。利克飞龙是首个环氧合酶/脂氧合酶(COX/LOX) 双靶点抑制剂，作为新一代的非甾体抗炎药，主要用于骨关节炎治疗。

最近文献报道提示，利克飞龙能显著的降低损伤血管内巨噬细胞的浸润和单核细胞趋化因子的表达，它的抗炎效果优于COX抑制剂罗非考昔。国外Ⅲ期临床研究表明：利克飞龙用于治疗骨关节炎与萘普生疗效相似，且能改善胃肠道安全性，耐受性优于萘普生，目前尚在进行临床研究中，国内目前对该药也正处在研制阶段。

结构

药理作用^[3]

利克飞龙(licofelone)是一种环氧合酶(COX)、5-脂氧合酶(5-LOX)的双重抑制 剂，是具有双重抗炎作用的非甾体抗炎药，与COX和LOX的活性位点都能结合，产生高效的抗 炎作用，而且能够缓解、改善和克服NSAIDs对胃肠道、心血管系统和肾脏等毒性。

应用 ^[1-2]

治疗关节炎：通过ig 给药，观察利克飞龙对大小鼠的抗炎活性以及炎性因子水平。研究结果显示，利克飞龙对二甲苯引起的耳肿胀有抑制作用，与对照组对比差异具有显著性（P＜0.05或P＜0.01），同等剂量与甲泼尼龙作用相当。利克飞龙对角叉菜胶引起大鼠足趾肿胀4 h 内的抑制作用明显，与甲泼尼龙作用相当。小鼠给予利克飞龙后，心率、呼吸和自主行为活动均未见异常，小鼠一周体质量增长正常。利克飞龙和塞来昔布均可使PGE2 浓度明显降低，与塞来昔布作用相当。

利克飞龙是德国默克公司研制新型环氧化酶/5脂氧化酶（COX/5-LOX）抑制剂，理论上既克服了非COX 选择性NSAIDs 药物胃肠道不良反应发生的可能性，同时又降低了COX2 选择性NSAIDs 药物心血管不良反应发生的可能性，实验结果表明利克飞龙抗炎作用与甲泼尼龙和塞来昔布相当，能产生高效抗炎作用，由于其抗炎作用明确且理论上安全性高，使患者能够长期服用，有望成为临床上用于解热、镇痛和治疗关节炎疾病首选药物之一。

用于心肌缺血/再灌注损伤。心肌缺血/再灌注损伤的发生机制复杂，与自由基生成过多、钙超载、白细胞浸润及内皮细胞自稳定失衡有关[5-6]。CK 主要分布于心肌细胞内，当心肌细胞缺血损伤时，Ca2+内流，细胞膜孔增大，引起CK从细胞内外溢，释放人血。因此，CK 外漏程度可间接反映心肌细胞的受损程度。本文显示利克飞龙处理显著降低缺血再灌注后血清CK 含量，提示利克飞龙能够降低心肌的缺血再灌注损伤。

NO是一种重要的心血管调节因子，对于冠心病、各脏器缺血再灌注损伤的发生、发展有着重要的意义。NOS 是NO 合成过程中的限速酶，NOS的含量对调节NO 的含量起到关键作用，NOS 分几种不同的亚型：(1)神经原型NOS (nNOS)；(2)内皮型NOS(eNOS)；(3)诱生型NOS (iNOS)。其中iNOS 主要分布在单核细胞、肥大细胞及中性粒细胞等细胞中。

生理情况下iNOS 无活性，当受到干扰素（IFN）、白介素-1（IL-1）等炎症因子刺激时则可以迅速产生大量NO。有文献报道，在心肌缺血/再灌注时，NO 的含增加，过量的NO 与氧迅速反应生成大量的氧自由基如ONOO －、ROONO、HNO2、NO － 2 及N2O3，它们均能产生硝化、亚硝基化和DNA 脱氨基作用，损伤DNA，发挥细胞毒作用；同时过量NO 还可引起心肌细胞凋亡、坏死和心功能紊乱。

研究显示利克飞龙能够抑制血清中总NOS 的活性，对缺血心肌细胞起到保护作用，减轻心肌缺血/再灌注损伤。利克飞龙引起NOS减少的可能机制是抑制细胞内炎症反应，减少了各类炎症因子的产生。综上所述，利克飞龙作为COX/LOX双靶点抑制剂，可以通过减少心肌缺血/再灌注时血清中NOS的含量，进而减少NO的含量，降低心肌细胞的损伤，以上结果提示该药物可能作为一个潜在治疗心脏疾病的药物。

检测^[4]

1. 色谱条件

色谱柱：Kromasil C1（8 250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈-0.05％磷酸水溶液（60 ∶40，V/V），流速：1.0 ml/min；检测波长：222 nm；柱温：25 ℃；进样量：10 μl。

2. 有关物质检查溶液的配制

1）供试品溶液：避光操作，精密称取样品细粉适量（相当于利克飞龙原料药20 mg），置于25 ml 量瓶中，加2 ml 乙酸乙酯超声（50 W，40 kHz）处理5 min，取出放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，过滤，即得。

2）自身对照溶液：避光操作，精密量取供试品溶液1 ml，置于100 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，过滤，即得。

3）空白辅料溶液：取空白辅料80 mg，置于25 ml 量瓶中，加2 ml 乙酸乙酯超声处理5 min，取出放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，过滤，即得。

3. 系统适用性试验

因本品对光不稳定，因此选择光降解产物进行系统适用性试验。精密称取样品细粉（批号：20120501，相当于利克飞龙原料药20 mg）及空白辅料适量，分别置于25 ml 量瓶中，加2 ml 乙酸乙酯超声处理5 min，取出放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，同置于强度4 500 lx 光照箱内照射0.5 h 后，摇匀过滤。精密量取10 μl，注入液相色谱仪，结果显示，主峰与相邻杂质峰分离度分别为3.6、5.7，分离度良好，理论板数以利克飞龙峰计为6 000，空白辅料未见干扰。

4. 专属性试验

为考察利克飞龙可能的降解产物及色谱条件的选择是否合理，采用酸、碱、氧化、高温和光照对其进行破坏处理。取利克飞龙细粉6 份（批号：20120501，每份相当于原料药20 mg），分别置于25 ml 量瓶中，加乙酸乙酯2 ml 超声5 min，取出放冷，分别进行以下处理。

5. 线性关系考察

避光操作，取利克飞龙对照品适量溶解并稀释至下列质量浓度：8.1、16.2、40.5、81、162 μg/ml，分别精密量取10 μl，照上述色谱条件，注入液相色谱仪，以峰面积（y）为纵坐标、质量浓度（x）为横坐标，进行线性回归，回归方程为：y＝9 456x－3 758（r＝0.999 9），表明利克飞龙检测质量浓度线性范围为8.1～162 μg/ml。

6. 精密度试验

精密量取溶液（81 μg/ml）10 μl 连续进样6 次，结果RSD为0.21％（n＝6），表明本方法精密度良好。

7. 检测限和定量限试验

精密称取利克飞龙对照品溶液逐级稀释后进样，当信噪比为3 ∶1 时，测得检测限为0.25 ng；当信噪比为10 ∶1 时，测得定量限为0.89 ng。

8. 稳定性试验

精密量取本品制备的供试品溶液10 μl，分别在0、1、2、3、4 h 内注入液相色谱仪，记录利克飞龙峰面积及杂质的变化情况。计算得主峰峰面积RSD 为1.6％（n＝5），杂质的含量逐渐增加，0～3 h 的杂质分别为0.06％、0.07％、0.08％、0.09％，于第4 h 时出现了大于0.1％的杂质，表明供试品溶液在3 h 内稳定。

9. 有关物质检查

采用主成分自身对照法计算总杂质量。分别精密量取供试品溶液以自身对照溶液各10 μl，注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的3 倍。供试品溶液中单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积的0.1％；杂质峰面积之和（除溶剂峰外）不得大于对照溶液主峰面积1.0％。

主要参考资料

[1]利克飞龙对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的干预作用研究

[2]利克飞龙的抗炎作用研究

[3] CN201611151330.6 利克飞龙联合氟康唑的抗真菌产品及其应用

[4] RP-HPLC法检查利克飞龙片中的有关物质