大黄素的药理作用及制备方法

背景及概述^[1][2]

大黄素，学名1，3，8-三羟基-6-甲基蒽醌。以游离和苷形式存在于蓼科植物掌叶大黄、大黄、唐古特大黄的根茎及根中。其可由植物提取或通过化学合成。大黄素是中药大黄的主要有效成分之一，在虎杖、何首乌等中药中含量也很丰富。大黄素是一种酪氨酸激酶抑制剂，现代药理研究发现大黄素具有消炎、抑菌、抗病毒作用，同时能抑制肿瘤生长，抗肾间质纤维化及利尿而保护肾脏，防治脂肪肝以及抗氧化、保护心血管系统等多种生物学功能。近年来的研究发现，大黄素对肺癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌等多种肿瘤均有抑制作用，其机制与抑制肿瘤细胞增殖、促进其凋亡、抗血管生成等多种途径相关，同时，大黄素与现临床上使用的抗肿瘤药物及放化疗等均具有较好的协同作用，鉴于大黄素具抗肿瘤作用且毒性较低，因此，其是应用于临床肿瘤治疗的潜在有效药物。

结构^[1，3]

药理作用^[2-3]

1. 抗炎、抑菌、抗病毒、抗真菌、抗原虫

1）抗炎：研究发现，1 次灌胃大黄素30、60mg/Kg能显著抑制角叉菜胶所致小鼠足踌肿胀，灌胃60、100mg/Kg能显著抑制角叉菜胶所致大鼠足踌肿胀，且随剂量增大，抑制作用增强；1次灌胃90、150mg/Kg能显著抑制醋酸引起的小鼠毛细血管通透性的增加；腹腔注射20、40mg/Kg能显著抑制角叉菜胶引起的大鼠急性胸膜炎的渗出与白细胞游走。

2）抑菌：大黄素具有广谱抑菌作用，对金黄色葡萄球菌不易产生耐药性，对链球菌亦很敏感，其次对白喉、枯草、炭疽、副伤寒、痢疾、流感杆菌及肺炎球菌和卡他球菌有效，对厌氧菌有很强的抑制作用。

3）抗病毒：大黄素对乙型肝炎病毒、巨细胞病毒、EB 病毒、冠状病毒、脊髓灰质炎病毒、单纯疤疹病毒均具有抑制作用。研究大黄素与不同中药活性成分配伍后体外抗萨科奇病毒的作用，对病毒直接作用效力最高的药物组合为大黄素：姜黄素：苦参碱=2：1：2 ；抗病毒合成效力最高的药物组合为大黄素：姜黄素：苦参碱=2：0：1。大黄素抗单纯疤疹病毒的作用主要通过抑制病毒的吸附和穿人过程而阻止病毒复制。

4）抗真菌：对茜草科、鼠李属等的抗真菌活性进行筛选，发现主要的葱酮配基包括大黄素具有抗真菌活性。

5）抗原虫：研究发现，大黄素具有广泛的抗原虫活性，包括罗德西亚布氏锥虫、杜氏利什曼原虫和恶性疟原虫lK 株。

2. 抗肿瘤作用

已有多篇文献报道了大黄素在体外和体内对多种肿瘤( 如肺癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、鼻咽癌、食管癌、神经细胞瘤、宫颈癌和卵巢癌等实体瘤，以及白血病等非实体瘤) 均具有抑制活性，包括抑制肿瘤增殖、促进肿瘤凋亡、逆转肿瘤耐药、抑制肿瘤血管生成、抑制肿瘤侵袭转移及增加肿瘤对化疗的敏感性等作用。

3. 肾保护、抗肾间质纤维化及利尿作用

1）肾保护作用：大黄素可以抑制糖尿病肾病大鼠p38 丝裂原活化蛋白激酶途径的活化并降低纤维蛋白连接素的表达，从而对糖尿病大鼠的肾脏起到保护作用。

2）抗肾间质纤维化：研究发现，大黄素能抑制人肾成纤维细胞周期的进程。

3）利尿作用：大黄素具有一定利尿作用，因此也具有一定降压作用。研究发现，大黄素对大鼠前体脂肪细胞的增殖和分化呈剂量时间依赖性，并可在一定程度上诱发前体脂肪细胞凋亡，故具有潜在的降脂、减肥作用。

4. 肝保护作用

大黄素具有防治肝癌、防治脂肪肝、抗肝细胞纤维化、抑制乙型肝炎病毒、保护受损肝细胞等作用。防治肝癌，研究发现，大黄素对肝癌细胞株均有较强的抑制作用。大黄素对酒精和高脂饲养诱导的大鼠脂肪肝有一定的防治作用。研究发现，大黄素对肝星状细胞增殖、细胞外基质合成的直接抑制作用可能是其抗肝纤维化的主要机制。大黄素在体外对乙型肝炎病毒具有一定的抑制作用；大黄素对肝脏缺血再灌注损伤具有保护作用，该作用与减轻肝脏缺血再灌注后脂质过氧化程度和肝窦内皮细胞损伤有关。

制备 ^[2][4]

大黄素的提取方法有两种：有机溶剂提取法和酸碱提取法。有机溶剂提取法可用氯仿、苯等有机溶剂直接进行提取，提取液在浓缩过程中有时会有结晶析出。也可用甲醇或乙醇进行抽提，抽提液浓缩后再用不同的溶剂进行分配或用不同pH 的水溶液进行萃取，从而达到初步分离的目的。由于大黄素含有酚羟基或浚基，在植物体内与钠、钾、镁等金属离子结合，以盐的形式存在，所以在提取时用酸使之完全游离出来，然后再进行提取。

加碱提取法是因为大黄素含有羟基基，含有羟基的葱酮类化合物可以直接用碱溶液进行抽提，再用酸使之沉淀的方法进行提取。有研究开发了一种用共结晶分离大黄素的方法，所述方法以大黄总蒽醌类提取物为原料，所述的大黄总蒽醌类提取物是由大黄根茎以醇为提取剂经回流法提取得到的浸膏，所述的方法包括如下步骤：将大黄总蒽醌类提取物与叔丁胺、异丙醇混合，以75~95%的含水乙醇作溶剂，在70~100℃下充分搅拌反应，得澄清溶液；将所得澄清溶液在4~8小时内缓慢冷却至-10~20℃，静置至析出结晶，过滤得到滤饼和滤液，滤饼用甲醇或75%~85%的含水乙醇重结晶，得到的晶体粗品加酸水溶液调pH值至2~4进行分解，再加入氯仿萃取，取有机层蒸除溶剂得到大黄素粗品，大黄素粗品经重结晶得到大黄素纯品。

主要参考资料

[1] 郭立杰, 蔡骏. 大黄素抗肿瘤作用的研究进展[D]. , 2008.

[2] 大黄素的研究进展

[3] 孙桂斌, 张萌, 严方, 等. 大黄素抗肿瘤活性及相关机制研究进展[J]. 药学进展, 2013, 37(6): 248-256.

[4] CN201310110849.X一种用共结晶分离大黄素的方法