14-3-3 gamma Rabbit Monoclonal Antibody

背景^[1][2]

单克隆抗体技术起源于Kohler等创建的体外鼠源杂交瘤技术。经多年研究，鼠单抗已从单纯的生物实验室科研及临床诊断发展到治疗性抗体药物。但鼠单抗的主要缺陷是小鼠免疫系统不能识别某些免疫原，尤其是鼠源性的免疫原，而且鼠单抗的亲和性不如兔来源抗体的亲和性高。

然而由于没有发现兔源性的浆细胞瘤及病毒体外转染兔B细胞的技术困难，直到1995年在c-myc/v-abl转基因兔身上成功地获得了兔浆细胞瘤细胞系，得到了稳定的兔-兔杂交瘤，才使兔单克隆抗体技术有了突破性进展。近年兔单克隆抗体技术日臻完善，目前商品化的兔单抗已达数千种。

14-3-3 蛋白在脑组织表达十分丰富，14-3-3gamma 蛋白主要在神经元中表达，它与许多蛋白结合，在细胞凋亡、生长、增殖的信号转导过程中发挥关键的调节作用，是细胞内重要的保护性蛋白，但14-3-3 蛋白在缺血性神经元中的作用还不清楚。实验结果显示14-3-3gamma 在局灶性脑缺血海马及大脑皮质的缺血周围区呈高表达，可见核表达。

推测14-3-3gamma 表达上调及入核可能激活转录，从而影响凋亡，发挥其细胞保护作用。14-3-3gamma 在缺血的神经元原代培养细胞中表达上调，通过结合Bad 滞留在细胞质中，从而阻止Bad 与Bcl2 /xl结合以及Bax 释放，达到抑制凋亡作用。

最近有研究表明，14-3-3Tau 亚型能够调节Beclin1 并参与了自噬过程。自噬是一个由溶酶体清除、降解细胞内蛋白及细胞器的过程，自噬在缺血损伤中具有作用，但是否14-3-3gamma 参与自噬过程，还有待进一步研究。14-3-3gamma兔单克隆抗体可用于分子印迹分析及 流式细胞仪等。注意14-3-3gamma兔单克隆抗体不适用于ICC/IF，IHC-P 或 IP。

应用

1. 在生物标记物开发中的应用

兔单克隆抗体包括14-3-3gamma兔单克隆抗体广泛用于生命科学研究的各个领域，尤其在免疫组织化学以及检测蛋白的转译后修饰方面具有独特优势。至今已有100多种兔单克隆抗体开发用于癌症的IHC临床诊断与研究，其中最具代表性的就是Her2和c-Kit的IHC诊断试剂盒。在蛋白修饰研究领域，如蛋白的磷酸化，在与疾病相关的蛋白质信号通路中起到了至关重要的作用，使用磷酸化蛋白的兔单克隆抗体可以非常清楚地显示蛋白的磷酸化程度。目前已有200多种磷酸化特异性的兔单克隆抗体面世。

2. 在治疗抗体药物开发中的应用

临床使用的大多数治疗用抗体均需经体外亲和力成熟这一步骤，以提高抗体的亲和力。这一过程常需8至12个月，最终亲和力在纳摩尔级(10-9 mol/L)。兔单抗不需使用体外亲和力成熟，就能达到10-11至10-13 mol/L。这种高亲和力不仅减少抗体的临床使用量，还能减少由于使用大量抗体带来的副作用。但这种高亲和力的优势还需在动物和临床试验中进一步证实。另外，与鼠单抗的人源化相比，

兔单克隆抗体的人源化更容易。因为，兔单克隆抗体主要由一种重链及轻链基因构成，通过分析大量的兔单克隆抗体序列发现，兔与人的抗体同源性更高，约60%～76%，而小鼠与人的抗体同源性略低，为57%～72%，说明用兔单克隆抗体开发药物前景更广阔。

主要参考资料

[1] 李婷婷，崔慧斐. 兔单克隆抗体的发展及应用前景[J]. 食品与药品，2012，14(9)： 373-376.

[2] 孙绍骞, 于春艳, 刘玉和. 大鼠大脑局部脑缺血周围区海马及大脑皮质 CLIC4 及 14-3-3gamma 蛋白的表达及其意义[J]. 中国老年学杂志, 2012, 1: 048.