粪肠球菌的制备方法及应用

背景及概述^[1][2]

粪肠球菌(Enterococcus faecalis)菌形圆或椭圆，可顺链的方向延长，直径0.5- 1.0微米，大多数成双或短链状排列，通常不运动。粪肠球菌(E.faecalis)是革兰氏阳性，过氧化氢阴性球菌，是人和动物肠道内主要菌群之一，其能产生天然抗生素，有利于机体健康；同时还能产生细菌素等抑菌物质，抑制大肠杆菌和沙门氏菌等病原菌的生长，改善肠道微环境；还能抑制肠道内产尿素酶细菌和腐败菌的繁殖，减少肠道尿素酶和内毒素的含量，使血液中氨和内毒素的含量下降。另外，粪肠球菌为消化道内正常存在的一类微生物，在肠黏膜具有较强的耐受和定植能力，并且是一种兼性厌氧的乳酸菌，适合于生产和应用，是一种很好的饲用微生物，在水产，畜禽上的应用广泛。

制备^[1]

现有的粪肠球菌制品的发酵方法所制备的粪肠球菌制品随着保存时间的延 长，其活菌数也降低明显，不耐保存。CN201710597414.0提供一种粪肠球菌制品的制备方法，该制备方法所制备的粪肠球菌制品活菌数含量高、存放时间久。

本发明的另一目的在于提供一种粪肠球菌制品，其由上述的制备方法制备得到， 其具有活菌数含量高、存放时间久等特点。本发明是这样实现的：一种粪肠球菌制品的制备方法，其包括：将活化的粪肠球菌种子液接种至固体发酵培养基进行发酵培养，置于35-37℃条件下，培养36-48h；其中，固体发酵培养基按重量份计包括：麸皮6.5-7.5份、豆粕2-4份、沸石粉1.5- 2.5份、水14-16份、碳酸钙0.1-0.2份以及磷酸氢二钾0.05-0.1份。

本发明具有以下有益效果：本发明提供的粪肠球菌制品的制备方法，采用包括有麸皮6.5-7.5份、豆粕2-4份、沸石粉1.5-2.5份、水14-16份、碳酸钙0.1-0.2份以及磷酸氢二钾0.05-0.1份的固体发酵培 养基对粪肠球菌种子液进行发酵培养，培养后的发酵产物经干燥、粉碎后即可粪肠球菌制品，该制备方法采用固体发酵工艺，固体发酵培养基的组分配比进行合理科学地搭配，确保所制备得到粪肠球菌制品单位活菌含量高、可经长时间存放，保存半年后活菌数仍可达80 亿CFU/g。

应用 ^[2]

用作饲料添加剂：

粪肠球菌（Enterococcus faecalis）是国家农业部公告第2045号公布的《饲料添加剂目录（2013）》允许用于养殖动物的微生物，就目前粪肠球菌作为添加剂使用的剂型，有水剂和粉剂两大类，其水溶液剂型因菌体容易利用水剂中的营养性物质继续代谢，生长发酵，因此，这种剂型的菌体处于不稳定状态，保存期较短。粉剂剂型则是将活的菌体利用低温热风、冷冻等干燥手段，将菌体进行慢速脱水，使菌体处于稳定的干燥休眠状态，再利用可以饲用的物质作为填充物质混合均匀制成较为稳定的粉剂型生物饲料添加剂。

CN201810511983.3提供了一种新的单一型粪肠球菌饲料添加剂，该粪肠球菌饲料添加剂不但具有菌体稳定，菌体存活时间长，且所采用的辅助性材料具有一定的粘附性和吸附性，能使菌体较好与辅助性材料黏合于一体，同时，其辅助性添加料具有一定的酸性，对动物饲食后，不仅能提供丰富的营养物质，同时其酸性物质能保持胃内pH值相对恒定，进入小肠后继续达到酸化的功效。其目的是提供一种更具稳定性和营养性的粪肠球菌饲料添加剂。本发明粪肠球菌饲料添加剂，其特征是由粪肠球菌与一定量的沙棘粉、刺梨粉、酸浆粉、黑加仑粉、仙人掌粉和炭化蛋壳粉均匀混合，得到一种新的粪肠球菌饲料添加剂，此添加剂的菌体稳定，菌体存活时间长，而且沙棘粉、刺梨粉、酸浆粉、黑加仑粉含糖量高，特别是仙人掌粉都具有较好的黏附性能，炭化蛋壳粉还具有较好的吸附性。其中沙棘、刺梨、酸浆、黑加仑均是高含量维生素C的果类，其酸性极强，不仅给养殖动物提供丰富的维生素等营养物质，其饲食后的酸性物质起到了很好的促进消化的效果，从而突显了本发明的目的。

为了实现本发明，具体采用了以下技术方案：粪肠球菌饲料添加剂，其特征它是首先由粪肠球菌、沙棘冻干粉、刺梨冻干粉、酸浆冻干粉、黑加仑冻干粉、仙人掌冻干粉混合均匀，再添加余量的炭化蛋壳粉混合均匀，复合包装制成：在每1000g饲料添加剂中粪肠球菌30000个亿-150000个亿，沙棘冻干粉5-50g，刺梨冻干粉5-50g、酸浆冻干粉3-30g、黑加仑冻干粉3-30g、仙人掌冻干粉50-150g，其余为炭化蛋壳粉。上述所述的粪肠球菌为粪肠球菌干粉制品。

主要参考资料

[1] CN201710597414.0 一种粪肠球菌及其制备方法

[2] CN201810511983.3 粪肠球菌饲料添加剂