人参皂甙Rg3的提取方法

背景及概述^[1]

人参皂甙Rg3有S型和R型两种旋光异构体，分别具有不同的生理和生物活性，其中人参皂甙Rg3(S)水溶性和生物活性要高于异构体Rg3(R)。人参皂甙Rg3(S)只存在于红参中，且含量很低，在生参和白参中未检测到人参皂甙Rg3(S)，人参皂苷Rg3(S)在体内外具有抗肿瘤作用、降低血压、神经保护作用、保护肝脏作用和抑制血管痉挛等多种功效。除此之外，Rg3(S)还是人参皂甙Rh2前体，而Rh2具有较强抗癌作用，2000年，国内已经将人参皂甙Rg3(S)作为抗癌药物应用于临床治疗，其药理学机制是抑制肿瘤细胞侵入和转移。

提取方法^[1-2]

报道一、

(1)称取80％人参/西洋参/三七茎叶总皂甙200g，并加入400mL乙酸乙酯，常温搅拌12h，抽滤，滤饼干燥得,混合粉末；

(2)称取第二混合粉末20g，加入300mL水，加热至100℃，搅拌反应20min，滴加体积比为10％盐酸水溶液300mL，滴加完毕，加入600mL乙酸乙酯和60mL水，搅拌10min，抽滤，得到滤饼和滤液，滤液用200mL饱和碳酸钠水溶液洗三次，乙酸乙酯相用无水硫酸钠干燥，旋干；滤饼用100乙酸乙酯和500mL石油醚打浆，抽滤，滤饼干燥得第二固体粉末4.7g；

(3)取0.05ml CAP、0.3ml十二醇、40ml苯和0.1ml 4-VP混匀超声4h后，加入1mlEGDMA和8mg AIBN,混匀超声10min后，得到混合物，将混合物用100mL的进样针取移取至一端封口的移液枪枪头内，枪头用保鲜膜及硅胶封口后于60℃反应24小时后取出，除去保鲜膜及硅胶，小心剪开末端的封口，用甲醇将模板分子洗尽后，得到印迹聚合物整体柱备用；

(4)将第二固体粉末粗品配成20％质量比的水溶液，使用印迹聚合物整体柱分离纯化，洗脱剂使用纯化水，洗脱剂的收集采用等份发自动收集，洗脱顺序依次为Rg3，Rg5，Rh1，Rh2，Rh3,。皂苷元被柱体吸附，整体柱使用完以后使用95％乙醇继续洗脱，把皂苷元洗脱下来，收率达20.1％，Rg3的含量可达98％。

报道二、

(1)提取：将1800kg人参根须预处理，以250kg/h速度投入多功能回流提取罐，加入8(V/M)倍量70％(V/V)乙醇，80℃高温回流提取2小时，提取两次，合并得到提取液；本步骤中人参根须的预处理方法为：在8-10℃，阴凉通风，风速2-3m/s，以原木网孔板平铺1-2cm 厚，阴干至平均含水率30-50％，

(2)提取液浓缩：将过滤后的提取液打入外循环浓缩罐，减压浓缩至浓缩终点，温度设定为60℃，真空度≥-0.06Mpa，浓缩终点为比重1.05-1.10,得浓缩液I；

(3)树脂吸附：将步骤(2)得到的浓缩液I上大孔吸附树脂柱吸附，上柱量按树脂：生药＝1:0.5，柱流速为10L/分；加入乙醇洗脱，待流下液至颜色变为黄色时开始收集解析液，收集至无颜色为止；

(4)解析液浓缩：将解析液在60℃，真空度≥-0.06Mpa环境下减压浓缩至浓缩比重1.10-1.15，得浓缩液II；

(5)弱酸水解：将浓缩液II泵入15(V/M)倍量含有保护剂的酸性醇水溶液中，该酸性醇水溶液为含盐酸浓度2mol/L，含5g/L抗坏血酸，浓度为45％的甲醇水溶液，在25℃下，氮气保护条件下，进行搅拌水解2天；

(6)精制萃取：用2mol/L碳酸氢钠中和水解反应液，减压蒸出甲醇，用步骤(5)终点反应液1倍量(M/M)的乙酸乙酯反复萃取提纯，并将萃取相水洗，将萃取得到的料液层(有机相)在50℃高温常压(1atm)下浓缩至无溶剂，然后再在真空度≥-0.06Mpa，70℃高温下浓缩至浓缩比重1.10-1.15，得浓缩液III；

(7)喷雾干燥：控制进风温度为185℃，出风温度为85℃，进浓缩液III，喷雾，得372.3kg人参干燥提取物，其中Rg3含量为13.9％。

参考文献

[1] [中国发明] CN201910856528.1 一种人参皂甙Rg3的提取方法

[2] [中国发明] CN201410385464.9 一种从人参中提取制备人参皂甙 Rg3 的方法