卵磷脂的纯化和纯度鉴定

背景及概述^[1]

卵磷脂是磷脂的主要组成成分。磷脂（Phospholipid），也称磷脂类、磷脂质，是一类含磷酸根脂质的总称，属于复 合脂质。磷脂在植物种子、动物脏器、血液、卵巢、蛋黄及细菌中与油脂并存，是生物细胞构 成的必需物质，也是生命的基础物质之一。

一般磷脂组成成分包括：卵磷脂、脑磷脂、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油和磷脂酰肌 醇。其中，卵磷脂是磷脂的主要组成成分，同时具有亲水性磷酸脂酪基、胆碱或胆胺等(极性 基团)和疏水性脂肪酸基(非极性基团)，因此卵磷脂是一种两性表面活性剂。具有分散、润 湿、溶解、消泡等作用，在营养和保健方面也起着非常重要的作用，能预防和治疗高胆固醇 和高脂血症，缓解糖尿病的病情等功能，因此，卵磷脂是目前公认的最具有生物学活性的磷 脂，在食品、医药、化妆品和饲料及其它工业部门都有着广泛的应用。

纯度鉴定^[1]

（1）称取500mg卵磷脂样品，用氯仿溶解并定容至100mL，配制成5mg/mL的溶液；

（2）将上述卵磷脂溶液点样于距一矩形薄层层析板底端1.0cm处，使点样下方的薄层层析与展开剂液面接触，当展开剂上缘距离薄层层析板顶端1.3cm时立即取出薄层层析板，待薄层层析板上展开剂凉干后，再将薄层层析板完全浸泡于显色剂中，然后取出；

（3）可观察至薄层层析板上的卵磷脂、脂肪酸与甘油酯、溶血卵磷脂的显色斑点分别是黄色、白色、乳黄色，将薄层层析板扫描后测量出其面积分别为36mm²、4mm²和4mm²；

（4）计算：卵磷脂的纯度。

纯化方法^[2]

一种硅胶柱层析法分离纯化卵磷脂的方法，

（1）取30g匀浆后的鱼卵，丙酮与鱼卵以1:5的料液比浸提35min，抽滤后滤饼用90% 的乙醇，在料液比1:5，提取温度30℃的条件下，超声辅助萃取15min，超声波功率为300w，脉 冲间隔2s，提取1次，抽滤；

（2）浓缩干燥：将乙醇提取液经40℃下减压浓缩后，置于45℃真空干燥得到粗磷脂 2.1g；

（3）分别将2.1g粗磷脂溶于异丙醇，氯仿和95%乙醇中，以2mL/min流速倒入硅胶柱 中，分别采用三种洗脱体系，包括异丙醇-甲醇溶液（1:1），氯仿-甲醇（1:1）和95%乙醇。用 TLC板检测样品的洗脱顺序。通过TLC分析，把与标准品卵磷脂有相同R值的PC馏分收集在一 起，减压浓缩至膏状，真空干燥得到的卵磷脂的纯度分别为：92%，93.12%，87.22%；说明氯 仿-甲醇体系洗脱效果，但是鉴于氯仿毒性较大，不宜用于卵磷脂的纯化。综合，选择异丙醇-甲醇洗脱体系为洗脱条件。

参考文献

[1] [中国发明,中国发明授权] CN201110003383.4 一种鉴别卵磷脂纯度的方法

[2] [中国发明,中国发明授权] CN201410501211.3 一种硅胶柱层析法分离纯化鱼卵中卵磷脂的方法