芝麻素的制备方法和含量检测

背景及概述^[1]

芝麻素是一种含于芝麻籽中的天然成分，芝麻籽包含约0.3－0.5％的芝麻素。芝麻素具有优良的抗氧化作用，可抗衰老、调节血脂、保护肝脏、降低血压、抗癌、调节免疫力、使头发黑亮等诸多生理功效。在人体试验中，证明芝麻素可运送至肝脏，在肝中代谢成抗氧化物质，抗氧化效果比维生素E更强。

制备^[1]

量取1L的芝麻油脚（965.8g），加入4L的无水乙醇，在30℃下搅拌5h，静置分层，取上层清液，旋转蒸发得到芝麻素富集物；向芝麻素富集物中加入无水甲醇，芝麻素富集物与无水甲醇的料液比为1∶4（kg/L），在55℃下浸取3h，得到浸取液；向浸取液中加入活性炭，活性炭的加入量为浸取液质量的1%，搅拌0.5h，然后过滤，得到芝麻素提取液；将芝麻素提取液缓慢降温至-10℃，使芝麻素结晶，结晶2h，过滤得到芝麻素粗品；向芝麻素粗品中加入石油醚，芝麻素粗品与石油醚的料液比为1∶1（kg/L），35℃下密闭混合0.5h，过滤得到芝麻素粗制品；将芝麻素粗制品溶于无水乙醇，芝麻素粗制品与无水乙醇的料液比为1:30（kg/L），在-5℃下结晶纯化，时间维持3小时，在此条件下经过2次结晶，真空干燥得到芝麻素产品2.16g，芝麻素的提取率为89.1%，所得芝麻素产品的纯度为92.1%。

含量测定^[2]

一种测定芝麻种子内芝麻素含量的方法，包括下列步骤：

（1）配制芝麻素标准溶液：称取芝麻素标准品10mg，加入无水甲醇溶解并稀释至50mL，然后用0.45μm的过滤膜过滤，得到0.2mg/ mL的芝麻素标准溶液；

（2）绘制芝麻素标准曲线：取步骤（1）所得的芝麻素标准溶液20、10、5、4、2、0.8mL，分别加入无水甲醇0、10、15、16、18、19.2mL，摇匀配制成梯度浓度分别为200、100、50、40、20、8ug/mL的芝麻素标准品甲醇溶液，使用液相色谱仪分别对上述溶液进行色谱分析，根据测定结果绘制芝麻素标准曲线（芝麻素标准品溶液的液相色谱图参见图1），并得到芝麻素含量与峰面积的线性关系方程：A=587.525675x-4.531582，其中A为峰面积，x为芝麻素含量；

（3）配制待测样品溶液：使用豫芝11号芝麻种子为待测样品，将待测芝麻种子用万能粉碎机粉碎30s，然后用0.35μm的筛子过筛，取所得的芝麻粉样品0.2g，加入浓度为100%的乙醇5mL；

（4）超声处理和过滤：将步骤（3）所得的混合溶液在30～60℃的条件下进行超声波处理20～50min，然后用0.45μm的过滤膜对超声处理后的溶液进行过滤；

超声波处理的条件为：使用超声频率为40KHZ、型号为KQ3200DE的数控超声波清洗器，在70～100W的超声功率下进行超声处理。

（5）检测：取步骤（4）所得的滤液9μl，使用液相色谱仪对该滤液进行进样检测，根据芝麻素标准曲线、所得线性关系方程计算得出待测芝麻种子中芝麻素的含量。

参考文献

[1] [中国发明,中国发明授权] CN201410052712.8 一种利用芝麻油脚提取芝麻素的方法

[2] [中国发明,中国发明授权] CN201510132312.2 测定芝麻种子内芝麻素含量的方法