猪去氧胆酸的制备方法

背景及概述^[1]

猪去氧胆酸（HyodesoxycholicAcid，HDCA）是广泛存在于动物胆汁中的一种生化物质，含量为0.1%～0.2%，化学名称为3α,6α-二羟基-5β-胆烷酸，分子式C24H40O4，分子量为392.58，在乙醇中易溶，丙酮中微溶，在乙酸乙酯、氯仿或乙醚中极微溶解，在水中几乎不溶。HDCA具有降血脂、镇痉和祛痰的作用，临床上用于治疗高血脂症、动脉粥样硬化症、气管炎、小儿病毒性上呼吸道炎症，以及由肝胆疾病引起的消化不良；对百日咳菌、白喉杆菌、金黄色葡萄球菌等有一定的抑制作用；作为清开灵注射剂中的有效成分，经临床观察，对急性白血病的治疗有良好作用，体外实验证明HDCA具有诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖分裂的作用。

制备^[1-2]

报道一、

1、猪去氧胆酸粗品的制备

取胆红素下脚料100g，加入氢氧化钠或氢氧化钾30g，水200ml，98℃皂化20h，冷至室温，静置，虹吸出上清液弃去，下层膏状物加入水200ml，搅拌溶解，添加浓盐酸酸化至刚果红试纸变蓝，加入乙酸乙酯800ml搅拌萃取30min，静置分层，水相弃去。乙酸乙酯相加入800ml水洗至水相pH=6，乙酸乙酯相加入无水硫酸钠20g脱水，10g活性炭脱色30min，过滤，浓缩至160ml左右，有沉淀析出，降温至3℃，过滤或压榨，真空干燥的猪去氧胆酸粗品35g。

2、猪去氧胆酸胺盐制备

猪去氧胆酸粗品35g，加入无水乙醇200ml，搅拌溶解，缓慢流加三乙胺10.5g，搅拌2h，降温至2度，有大量沉淀析出。过滤干燥得猪去氧胆酸胺盐20g。

3、高纯度hdca的制备

猪去氧胆酸胺盐20g，加入水200ml，氢氧化钠2g，搅拌溶解，滴加体积浓度为1:1的盐酸12ml，搅拌1h，过滤，干燥得猪去氧胆酸15g，液相含量99%以上，熔点200-201℃。

报道二、

步骤1：取猪胆膏200g，加入1600mL水，200g氢氧化钠，经搅拌使其溶解，加热至沸后保持搅拌10h，静置降至室温，去除上层黄棕色清夜，下层为黑色粘稠物。加入氢氧化钠发生皂化反应，将猪胆膏中结合形式的胆汁酸变成游离形式的胆汁酸钠盐。

步骤2：向黑色粘稠物中加入20mL双氧水，搅拌脱色5h，以保证双氧水将色素氧化，除去色素。在皂化后的碱性条件下用双氧水脱色，既达到工艺操作方便又节省时间。

步骤3：向上一步骤中加入1600mL水搅拌溶解，用稀硫酸调节pH至6.5，再用氨水调节pH至8.5。此步骤中加水稀释的目的是稀释后有利于猪去氧胆酸与步骤4加入的镁盐反应。用稀硫酸调节pH至6.5是为了中和步骤1所加的氢氧化钠；用氨水调节pH至8.5，以保证反应液为弱碱性，利于步骤4的反应。

步骤4：将步骤3处理后的猪胆膏加热至50℃，加入0.3g/mL的镁盐溶液100mL，搅拌降至室温，保持结晶5h，过滤，收集固体。根据本发明的实施例，镁盐可以为硫酸镁、醋酸镁中的一种或者两种的混合物；优选的，镁盐为硫酸镁。此步骤中加入的镁盐与猪去氧胆酸结合形成猪去氧胆酸镁盐沉淀物从而结晶析出。

步骤5：将上一步骤中的固体用1600mL的水搅拌溶解，再加入30g碳酸钠，加热回流1h，静置降至室温，过滤收集滤液。加入碳酸钠的目的是将步骤4所得的猪去氧胆酸镁盐沉淀物与钠盐反应成可溶于水的猪去氧胆酸钠盐从而溶解于滤液中。

步骤6：将上一步骤中的滤液用稀硫酸调pH至3，压滤，洗涤滤饼至pH为6-7，干燥粉碎得猪去氧胆酸纯品26g。将上一步骤的滤液用稀硫酸调pH至3，以保证可溶于水的猪去氧胆酸钠盐在酸性条件下反应成不溶于水的猪去氧胆酸。洗涤滤饼至pH为6-7，以保证猪去氧胆酸成品中无残留的硫酸和硫酸钠，确保猪去氧胆酸的品质。

参考文献

[1][中国发明,中国发明授权]CN201410019946.2一种高纯度猪去氧胆酸的制备方法

[2][中国发明,中国发明授权]CN201210554747.2从猪胆膏中提取猪去氧胆酸的方法