正常人AB血清的应用

背景及概述^[1]

人血清血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反应被激活，血液迅速凝固，形成胶冻。凝血收缩，其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清，也可于凝血后经离心取得。正常人AB血清来自于AB血型健康男性供体，该血清是由AB血浆经去纤维蛋白得到的，所有供体病毒标志物检测为阴性。

应用^[2-3]

应用一：

正常人AB血清用于DC细胞的体外培养：用肝素抗凝管采集患者自体的外周血40-50ml，通过Ficoll-Hypaque密度梯度离心分离外周血单个核细胞(PBMC)，PBMC在含5-10％灭活的正常人AB血清的l640培养基里培养30-90min，吸去悬浮细胞，贴壁细胞用含800-2000U/mlGM/CSF、500-1000U/mlIL-4、5％正常人AB血清的1640培养基中在6孔培养扳中培养5-7天。可见悬浮的有树突形状的成熟DC细胞。

应用二：

正常人AB血清用于间充质干细胞的制备和培养：

a)使用无菌手动，或自动方法处理脐带或胎盘组织至小于1mm大小

b)进一步可使用无菌组织研磨设施处理组织至更小的颗粒

c)室温离心250g5分钟，弃去上清，收集细胞，用DMEM清洗。再次离心和清洗。

d)常规胶原酶，胰蛋白酶处理组织。

e)常规收集储存代和培养后收集第二，三代间充质干细胞。

f)培养采用Dulbecco’smodifiedeagle’smedium(DMEM，Gibco，USA)，10％自身血清或正常人AB血清，1％glutamine(Gibco，USA)及无血清培养液。

参考文献

[1]正常人AB血清说明书

[2]CN201610859460.9一种乳腺癌特异性CTLs的制备方法

[3]CN200810052286.2临床治疗用脐带胎盘间充质干细胞的制备储存和应用