正常人AB血清

背景^[1-7]

正常人AB血清采用AB血型正常人血液为原料，经无菌采集、分离、微孔过滤后而成。本产品无支原体、无病毒、无噬毒体、内毒素含量低于1EU/ml，适用于细胞、组织器官培养、细胞株保藏、单抗研制、T细胞免疫治疗，是医院、科研院校、动物疫苗、生物制药厂家重要培养基之一。也适用于动物免疫，血清IgG制备，病理组化封闭，ELISA等等。血浆与血清的区别是血清中不含纤维蛋白原等凝血因子。血浆是血液的液体成分，血细胞悬浊于其中。

人体含有2750-3300毫升血浆，约占血液总体积的55%。血浆的绝大部分是水（体积的90%），其中溶解的物质主要是血浆蛋白，还包括葡萄糖、无机盐离子、激素以及二氧化碳。血浆的主要功能是运载血细胞，同时也是运输分泌产物的主要媒介。将新鲜血液离心，使血细胞沉降，上层淡黄色清液即是血浆。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。

它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。融解过程中必须摇晃均匀减少蛋白沉淀的产生。

特点：人AB血清中缺少抗A、B血型抗原的抗体，常用于使免疫反应降到最低。已经证实，人AB血清可以提高多数人来源细胞生长速率，并且使用浓度比混合型血清更低。更适用于细胞、组织器官培养、细胞株保藏、单抗研制。

应用^[8][9]

正常人AB血清可用于研究培养成人骨髓基质干细胞增殖及成骨分化：

大段骨缺损的重建修复是骨外科常见的重要的临床难题。当前临床治疗方法主要包括骨材料移植(自体移植、同种异体移植或异种移植)、不同生物材料植入或骨传输生长方法(Ilizarov技术),但这些技术均存在一定的不足,不能满足临床需要。近年来骨组织工程的迅速发展为骨缺损的治疗提供了新的思路,并且已由基础研究过渡到临床的初步应用阶段。

临床应用不同于动物实验,首先需要考虑治疗的安全性。因此骨组织工程种子细胞的选择,材料的选择以及种子细胞的体外培养过程等问题都是需要谨慎注意的。骨髓基质干细胞(marrow mesenchymal stromal cells, MSCs)因其取材方便,可在体外大量扩增并保持成骨潜能,较低的免疫原性,转入外源基因后不影响其增殖、分化特性等特点,被认为是骨组织工程理想的种子细胞。

传统的细胞培养方法采用胎牛血清作为营养支持。尽管优质胎牛血清经过了严格的处理,但仍然存在潜在传播疾病的风险和免疫排斥反应。在成人骨髓基质干细胞增殖及分化的研究中采用AB血清(AB serum,ABS)、自体血清(autologous serum,AS)替代胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)作为营养基质,比较3种不同培养体系体外培养hBMSCs增殖分化的效果,为骨组织工程由基础研究向临床应用提供一定的理论依据。

研究目的探讨AB血清、自体血清替代胎牛血清体外培养成人骨髓基质干细胞增殖及成骨分化的效果,并初步探讨其促成骨的机制。结果AB血清促hBMSCs曾殖的效率最高。流式细胞仪检测细胞凋亡率结果显示,胎牛血清组细胞凋亡率为(4.34±0.59)%,自体血清组为(4.31±0.70)%,AB血清组为(4.33±0.76)%。

各相同时间点,AB血清组细胞碱性磷酸酶活性均高于胎牛血清组、自体血清组,且于7d出现峰值。实验证明,采用AB血清和自体血清培养的hBMSCs生长至第3代时,纯度较高,活力旺盛,并具有向成骨细胞和脂肪细胞分化的潜能。hBMSCs来源丰富,取材容易,创伤小,是理想的组织工程种子细胞,具有广阔的应用前景。2.AB血清对hBMSCs增殖和成骨分化作用较胎牛血清、自体血清明显增强。

参考文献

[1]Use of an alpha-smooth muscle actin GFP reporter to identify an osteoprogenitor population[J].Zana Kalajzic,Haitao Li,Li-Ping Wang,Xi Jiang,Katie Lamothe,Douglas J.Adams,Hector L.Aguila,David W.Rowe,Ivo Kalajzic.Bone.2008(3)

[2]Challenges to Human Embryonic Stem Cell Patents[J].Aurora Plomer,Kenneth S.Taymor,Christopher Thomas Scott.Cell Stem Cell.2008(1)

[3]A Scientist’s View of the Ethics of Human Embryonic Stem Cell Research[J].Anne McLaren.Cell Stem Cell.2007(1)

[4]Mesenchymal stem cell tissue engineering:Techniques for isolation,expansion and application[J].Ippokratis Pountos,Diane Corscadden,Paul Emery,Peter V.Giannoudis.Injury.2007

[5]Bone morphogenetic protein-4 is overexpressed in colonic adenocarcinomas and promotes migration and invasion of HCT116 cells[J].Haiyun Deng,Ryouji Makizumi,T.S.Ravikumar,Huali Dong,Wancai Yang,Weng-Lang Yang.Experimental Cell Research.2007(5)

[6]Bone Morphogenic Protein-4 Induces Hypertension in Mice:Role of Noggin,Vascular NADPH Oxidases,and Impaired Vasorelaxation[J].Sumitra Miriyala,Maria C.Gongora Nieto,Christopher Mingone,Debra Smith,Sergey Dikalov,David G.Harrison,Hanjoong Jo.Circulation.2006(24)

[7]Bone Marrow Stromal Cells(BMSCs)in Bone Engineering:Limitations and Recent Advances[J].Anna R.Derubeis,Ranieri Cancedda.Annals of Biomedical Engineering.2004(1)

[8]Prions in dermatology[J].Omar Lupi.Journal of the American Academy of Dermatology.2002(5)

[8]李方国.不同来源血清对成人骨髓基质干细胞增殖及分化的研究[D].南方医科大学,2011.