Mouse Anti-Human IgE Antibody的应用

背景^[1-3]

Mouse Anti-Human IgE Antibody是一类可以特异性结合Human IgE的多克隆抗体，主要用于检测Human IgE的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

正常情况下血清IgE仅在ng/ml水平，用常规测定IgG或IgM的凝胶扩散法检测不出IgE，必须用高度敏感的放射免疫测定法及酶联免疫测定法进行检测。

1．放射免疫吸附剂试验（radioimmunosorbenttest，IRST）是将抗IgE吸附到固相载体上用以检测血清IgE的方法，故又称固相放射免疫测定（SPRIA）；临床常用双抗体夹心法，多以滤纸为载体。将抗IgE抗体偶联到经溴化氟活化的滤纸上，使其与待检血清及IgE参考标准进行反应；洗涤后加入125I标记的抗人IgE，再经洗涤后测定滤纸片的放射活性，其测定值与标本中的IgE含量呈正相关。

2．酶联免疫测定法测定血清IgE时也常用双抗体夹心ELISA法，操作方便，敏感性也很高，在临床上经常应用。

3．间接血凝试验用抗IgE至敏红细胞，将标本血清做系列稀释后与致敏红细胞反应。此法更加简便易行，便于普及，但敏感性比上两法稍低。

IgE和IgG4（以下只用IgE代表）是介导Ⅰ型变态反应的抗体，因此检测血清总IgE和特异性IgE对Ⅰ型变态反应的诊断和过敏原的确定很有价值。IgE升高相关的常见疾病有：过敏性哮喘、季节性过敏性鼻炎、特应性皮炎、药物性间质性肺炎、支气管肺曲菌病、麻风、类天疱疮及某些寄生虫感染等。

应用^[4][5]

用于日本血吸虫童虫细胞诱导小鼠抗攻击感染的免疫学研究

为了进一步确认其免疫效果；比较童虫细胞和成虫细胞，死细胞与活细胞诱导宿主所产生的保护性效果差异及其免疫应答特点；探索的免疫次数。

方法:S．j尾蚴感染小鼠获得虫体。胰酶消化法制备虫源性细胞。台盼蓝染色检测细胞活率。活细胞经-20℃冻融后定为死细胞。PCR扩增鉴定血吸虫虫源性细胞的种属特异性并检测细胞的纯度。

在实验一中，53只昆明小鼠被分成4组，即对照组10只、18天童虫活细胞(LLC)免疫组18只、18天童虫死细胞(DLC)免疫组13只和42天成虫死细胞(DAC)免疫组11只。每两周分别用各免疫原对小鼠作皮下注射，共4次。于末次免疫后1周用30±1 S．j尾蚴对小鼠进行攻击感染。感染后第42天剖杀冲虫，观察结果。

根据实验1结果，LLC是诱导小鼠产生保护性效果的免疫原，因此，在实验二中选择了LLC对昆明小鼠作不同次数免疫，比较所诱导产生的保护性免疫，探索免疫次数。28只小鼠随机分为4组：免疫1次组(V1)、2次组(V2)和3次组(V3)及对照组(Co)。

于末次免疫后第2周用30±1 S．j尾蚴进行攻击感染。感染后第45天解剖小鼠冲虫。保护性效果的观察指标包括：计数虫荷及卵荷；测量虫体长度和肝组织内虫卵肉芽肿面积；对虫卵肉芽肿进行组织病理学观察。

免疫学观察指标包括：ELISA检测免疫前后不同时点鼠血清中特异性总抗体(IgG+A+M)和IgG亚类抗体水平的动态变化；用SDS-PAGE及Western-blot对虫体与细胞的成分差异及免疫特性差异进行比较分析。

参考文献

[1]The Recombinant Immunogen with High‐Density Epitopes of ELDKWA and ELDEWA Induced Antibodies Recognizing Both Epitopes on HIV‐1 gp41[J].Zuguang Wang,Zuqiang Liu,Xiwen Cheng,Ying‐Hua Chen.Microbiology and Immunology.2005(8)

[2]Mapping of conformational IgE epitopes on Phl p 5a by using mimotopes from a phage display library[J].The Journal of Allergy and Clinical Immunology.2004(6)

[3]Overview:from the horse experimentation by Prof.Akira Fujinami to paramyosin[J].Somei Kojima.Parasitology International.2004(2)

[4]A vaccine against Asian schistosomiasis[J].Donald P McManus,Paul B Bartley.Parasitology International.2004(2)

[5]蔡力汀.日本血吸虫童虫细胞诱导小鼠抗攻击感染的免疫学研究[D].中南大学,2006.