小鼠肾皮质上皮细胞的应用

背景^[1-3]

小鼠肾皮质上皮细胞分离自小鼠肾皮质上皮组织，肾实质分为皮质和髓质两部分。肾皮质位于肾外层浅层，主要由肾小体和肾小管构成。肾小体是形成原尿的主要结构，近似球形，直径约为200μm，其中央部分是毛细血管组成的肾小球，肾小球外面紧包肾小囊。肾小体有两个极，一侧为出入肾小体的血管极，对侧为与肾小管相连接的尿极。皮质有伸向髓质的肾柱，皮质厚度为1cm，占肾实质的1/3，含有丰富的血管，呈红褐色。肾皮质是肾泌尿的重要部分。肾脏上皮细胞在肾脏功能中有着重要的作用。

同多数上皮细胞一样，肾脏上皮细胞呈现两极化的形态特征，这与其功能是相适应的。它能重吸收原尿中几乎全部的葡萄糖和氨基酸，同时排泌其它非营养物质进入终尿。还能够内化细菌。它也是许多先天性疾病、代谢性疾病和炎症的主要损伤部位。肾皮质上皮细胞能产生IL-8或直接趋化白细胞参与急性炎症反应。在移植肾炎症和新月体肾炎中肾皮质上皮细胞表达IL-2Ralpha和MHC-Ⅱ类抗原，这说明肾小管上皮细胞能参与肾免疫损伤的发生。为了研究肾小管细胞和多种肾疾病之间的关系，肾皮质上皮细胞为我们提供了很好的体外模型。

应用^[4][5]

用于TRPC6及BKCa通道蛋白在小鼠肾皮质和海马发育中表达的研究

在脑和肾脏中,TRPC6参与多项生理功能。大电导钙激活钾离子通道(BKCa通道)广泛表达于机体中多种细胞,并在许多生理及病理条件下,发挥着举足轻重的作用。然而BKCa通道在小鼠生后发育过程中肾皮质和海马的分布与表达还没有报道。

此外,TRPC6作为一个重要的离子通道在肾脏中主要在足细胞中表达,研究发现足细胞中的TRPC6对足细胞中的细胞信号转导的钙稳态的调节起着至关重要的作用。其中,足细胞是一个很特别的细胞类型,它包裹着的肾小球毛细血管。

采用免疫组化和免疫印记的方法检测TRPC6通道以及BKCa通道在肾皮质和海马中的分布和表达。

在实验研究中,采用小鼠永生足细胞系MPCs作为实验对象,培养未分化的足细胞,然后去除限制性因素使足细胞进入分化成熟阶段。取未分化,分化3,6,9,12,及成熟的足细胞(d0,d3,d6,d9,d12和mature)进行形态学观察,以及免疫组化,免疫印记实验以及全细胞膜片钳,研究足细胞随分化的形态变化,TRPC6通道以及BKca通道在足细胞分化过程中的分布与表达及其功能变化。

实验结果TRPC6在肾小体发育的各个时期以及海马的各区都有表达。在海马中TRPC6的表达量增加,在出生后P7和P14之间表达量呈现一个显著的增加。同时,TRPC6在肾皮质,尤其是。肾小球的表达随发育过程呈下降趋势。

参考文献

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[2]Voltage‐dependent ionic channels in differentiating neural precursor cells collected from adult mouse brains six hours post‐mortem[J].CarmeloBellardita,FrancescoBolzoni,MelissaSorosina,GiovanniMarfia,StephanaCarelli,AlfredoGorio,AlessandroFormenti.J.Neurosci.Res..2012(4)

[3]Podocyte Biology for the Bedside[J].J.Ashley Jefferson,Charles E.Alpers,Stuart J.Shankland.American Journal of Kidney Diseases.2011(5)

[4]Antecedent Ethanol Attenuates Cerebral Ischemia/Reperfusion‐Induced Leukocyte‐Endothelial Adhesive Interactions and Delayed Neuronal Death:Role of Large Conductance,Ca2+‐activated K+Channels[J].QUNWANG,THEODORE J.KALOGERIS,MEIFANGWANG,ALLAN W.JONES,RONALD J.KORTHUIS.Microcirculation.2010(6)

[5]许蓬娟.TRPC6及BK_(Ca)通道蛋白在小鼠肾皮质和海马发育中表达的研究[D].南开大学,2013.