维生素B9的纯化方法

背景及概述^[1]

维生素B9(VB9)，也就是叶酸，是由喋呤啶、对氨基苯甲酸和谷氨酸等组成的化合物，是一种水溶性B族维生素。叶酸作为重要的一碳载体，在核苷酸合成、同型半胱氨酸的再甲基化等诸多重要生理代谢功能方面有重要作用。因此叶酸在快速的细胞分裂和生长过程(如婴儿发育、怀孕)中有尤其重要的作用。有研究证实，人类(或其他动物)如缺乏叶酸可引起巨红细胞性贫血以及白细胞减少症，还会导致身体无力、易怒、没胃口以及精神病症状。此外，研究还发现，叶酸对孕妇尤其重要。如在怀孕头3个月内缺乏叶酸，可导致胎儿神经管发育缺陷，从而增加裂脑儿，无脑儿的发生率。其次，孕妇经常补充叶酸，可防止新生儿体重过轻、早产以及婴儿腭裂(兔唇)等先天性畸形。

适应症^[2]

1.预防胎儿先天性神经管畸形。

2.妊娠期、哺乳期妇女预防用药。

用法用量^[2]

1.预防胎儿先天性神经管畸形：口服，育龄妇女从计划怀孕时起至怀孕后三个月末，一次0.4mg，一日1次。

2.妊娠期、哺乳期妇女预防用药：一次0.4mg，一日1次。

不良反应^[2]

不良反应较少，罕见过敏反应。长期用药可出现畏食、恶心、腹胀等胃肠道症状。大量服用叶酸时，可使尿液呈黄色。

注意事项^[2]

1.请严格按照用法用量服用，如需加量，请咨询医师。

2.服用本品期间，服用其他含有叶酸的复合维生素类药物或保健食品请咨询医师。

3.对本品过敏者禁用，过敏体质者慎用。

4.本品性状发生改变时禁止使用。

5.请将本品放在儿童不能接触的地方。

6.如正在使用其他药品，使用本品前请咨询医师或药师。

药物相互作用^[2]

1.大剂量叶酸能拮抗苯巴比妥、苯妥英钠和扑米酮的抗癫痫作用，可使癫痫发作的临界值明显降低，并使敏感患者的发作次数增多。

2.口服大剂量叶酸，可以影响微量元素锌的吸收。

3.如与其他药物同时使用可能会发生药物相互作用，详情请咨询医师或药师。

药理作用^[2]

叶酸是一种水溶性B族维生素，为人体细胞生长和繁殖的必须物质。本品经二氢叶酸还原酶及维生素B12的作用，形成四氢叶酸，后者与多种一碳单位（包括CH3、CH2、CH0等）结合成四氢叶酸类辅酶，传递一碳单位，参与体内很多重要反应及核酸和氨基酸的合成。

纯化方法^[3]

(1)向碱溶罐中加入40L水，开搅拌，边搅拌边向碱溶罐中投加5.4kg叶酸粗品(纯度为60％，氨一的含量为15％，蝶酸的含量为1％)，之后打开装有碱液且位于高位的罐体上的阀门，在室温下用35wt％氢氧化钠调节叶酸粗品料液的pH值至7；

(2)将步骤(1)的料液加热至60℃，随后加入0.2kg活性炭进行脱色，搅拌15min后，升温至100℃，再加入0.05kg硫代硫酸钠，搅拌1h，之后开启碱溶罐底阀门，将罐内物料压入板框压滤机，压滤得滤液。

(3)用1mol/L的盐酸调节上述滤液的PH值至3-4，降温至50℃析晶，之后抽滤得滤饼。

(4)在40℃下，边搅拌边将上述滤饼加入8.1L稀硫酸(浓度为30％)中，继续搅拌至全溶，然后抽入含30L水的水析罐中，搅拌10min、静置0.5h，抽滤得黄色的固体即为纯化后的叶酸。经LC-MS检测，纯化后的叶酸纯度最高能达到99.24％，氨一的含量为0.1％左右，蝶酸的含量为0.1％左右，其他杂质为0.5％左右。多次检测，结果不变。叶酸保存六个月后，经LC-MS测试，纯度为99.24％，氨的含量为0.12％，蝶酸的含量为0.11％。

在上述纯化方法中，也可省去步骤(3)，直接将步骤(2)得到的滤液加入到步骤(4)的稀硫酸中，经水析、抽滤得到的叶酸固体也为黄色，但略偏暗，其纯度及杂质含量与上述纯化方法得到叶酸的纯度及杂质含量相同，也属于合格产品。

参考文献

[1]CN201120456224.5维生素B9酶联免疫吸附测定试剂盒

[2]叶酸片说明书

[3][中国发明]CN201710039800.8叶酸的纯化方法