A549细胞的应用

A549细胞的简介^[1]

A549 细胞是人肺泡腺癌基底上皮细胞。 A549 细胞系最早由D.J.Giard 等人于1972 年发现， 从58 岁的白种男性的外植肿瘤的癌性肺组织中分离并培养。 在自然界中，这些细胞是鳞状的，并且负责一些物质（例如水和电解质）跨肺的肺泡扩散。 如果A549 细胞在体外培养，它们作为单层细胞生长，粘附或附着在培养瓶上。

A549细胞培养条件^[1]

37℃，5% CO₂，无菌恒温培养。A549 细胞增殖能力取决于培养技术、培养条件等综合因素。请按照正确的培养方法来复苏、传代、冻存，以此保证细胞具备良好的增殖能力，方便您的后继研究顺利进行。

细胞传代^[1]

1. 当细胞融合度达到90%以上时，给细胞传代；

2. 37°C 水浴预热培养基；

3. 在超净台中，弃培养基，加入2-5mlPBS 清洗细胞后，再加入1ml 胰酶消化细胞；

4. 显微镜下观察到细胞变圆，有细胞开始脱离瓶壁时，加入5ml 培养基终止消化；

5. 用移液器轻轻吹下瓶壁上剩余的细胞，并轻轻吹打将细胞吹散；

6. 将细胞移入离心管中，1000rpm离心5min；

7. 弃上清，加入5ml 的培养基（含10% FBS）重悬细胞后转入T25 瓶中（确保细胞贴壁后融合度在25-50%之间），细胞密度在1×10⁴ cells/cm² (2.5×10⁵ cells/T-25 瓶），混匀细胞悬液，确保细胞均匀分布；

8. 将培养瓶置于37°C，5% CO₂ 的无菌培养箱中培养。

主要参考文献

[1] 雷怀定  刘先军  涂明利  熊畅  刘为舜；苦参碱对体外人肺癌A549细胞的抑制作用。《实用医学杂志》 2006年15期。