大鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(VASPIN)ELISA试剂盒

概述^[1]

大鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(VASPIN)ELISA试剂盒英文名称：Rat Visceral adipose-specific serine protease inhibitor,vaspin ELISA Kit，用于定量检测血清、血浆及相关液体样本中大鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂（vaspin） 的含量。

实验原理^[1]

大鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(VASPIN)ELISA试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠vaspin抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的大鼠vaspin与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠vaspin抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗大鼠vaspin抗体与结合在包被抗体上的大鼠vaspin结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，大鼠vaspin浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中大鼠vaspin的浓度。

操作步骤^[1]

1. 在各孔中加入标准品或样品各100μL， 37℃孵育90分钟

2. 加入100μL 生物素化抗体工作液，37℃孵育60分钟

3. 洗涤3次

4. 加入100μL酶结合物工作液， 37℃孵育30分钟

5. 洗涤5次

6. 加入90μL底物溶液， 37℃孵育15分钟左右

7. 加入50μL终止液，立即在450nm波长处测量OD值

8. 结果计算

主要参考文献

[1] 张晓东；王馨；张琳。冠心病患者血清人内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂水平分析。中国药物与临床。