维特克拉的主要制备方法

背景及概述^[1]

维特克拉(venetoclax，ABT-199)是选择性B细胞淋巴瘤因子-2(B-celllymphoma-2，BCL-2)抑制剂，是美国FDA批准的、用于治疗慢性淋巴细胞白血病的突破性药物，受到全球有关方面的广泛重视。该药物的作用靶点是BCL-2的亚型BCLxL，对BCL-2的其他亚型无明显作用。该化合物的相对分子质量为868.44，水溶性较差，但膜通透性良好，属生物药剂学分类系统(biopharmaceuticalclassificationsystem，BCS)第二类药物。维特克拉的原研制剂为维特克拉片剂，未在中国大陆进行销售，在美国上市的维特克拉片也无体内体外相关性公开报道。如需进行仿制，首先要做到仿制药与原研药体内生物利用度的一致性(bioequivalency，BE)，而进行体内外相关性研究，找到与体内释药相关的体外溶出条件，可大幅度降低仿制药的研发成本并提高成功率(通过BE)。且此药物是针对BCL-2靶点的首个上市新药，开展其体内体外相关性研究，也为该靶点的其他创新药物研究提供参考，有利于提高BCL-2靶点的其他相关药物制剂成功研发上市的概率。

应用^[2]

维特克拉化学名为4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺，是个靶向B细胞淋巴瘤因子2(BCL-2)的选择性抑制药。白血病患者细胞中的B细胞淋巴瘤因子2(B-celllymphoma-2，BCL-2)可促进癌细胞生长，在B淋巴细胞和其他B细胞恶性肿瘤中常过度表达，于2016年4月11日被FDA批准上市，用于慢性淋巴细胞白血病。

体内体外相关性^[1]

考察维特克拉(venetoclax)制剂的体外释药行为和在比格犬体内的药动学过程，进行体内体外相关性(IVIVC)的研究。研究测定维特克拉制剂在不同溶出介质中的溶出曲线；建立维特克拉在比格犬血浆样品中的HPLC测定方法，并对市售的维特克拉片进行饱腹和空腹下比格犬体内的药动学研究；将药物在体外累积溶出度数据与在体内的累积吸收百分数数据进行线性回归，进行IVIVC研究。结果维特克拉制剂在4种不同溶出介质中体外的释药行为存在明显差异；维特克拉制剂饱腹和空腹的AUC0→∞分别为(32.38±5.87)和(27.70±6.32)mg·h·L－1，达峰浓度分别为(4.04±0.78)和(3.72±0.69)μg·mL－1，达峰时间分别(6.01±1.04)和(4.27±0.92)h，其中AUC0→∞和达峰时间的差异具有显著性(P＜0.05)；体内吸收百分数与在0.2%SDSpH6.8介质中的体外溶出度有良好的IVIVC。结论食物可提高维特克拉制剂的生物利用度；实验筛选出的0.2%SDSpH6.8介质(桨法，75r·min－1)可以作为与该制剂体内释药相关的体外溶出条件。

制备^[2]

一种维特克拉的制备方法：

步骤1：4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-[(3-硝基-4-氟苯基)磺酰基)]-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺/4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-[(3-硝基-4-氯苯基)磺酰基)]-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(Ⅲ)的制备

将化合物(Ⅱ)(20.0g，35.0mmol)溶于300mL二氯甲烷(DCM)中，室温条件下依次加入3-硝基-4-氟苯磺酰胺(8.5g，38.5mmol)、4-二甲氨基吡啶(DMAP)(6.4g，52.5mmol)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC.HCL)(10.1g，52.5mmol)。控制温度20～30℃搅拌反应16小时。反应完毕后加入5％乙酸水溶液100mL洗涤一次，然后再用100mL水洗涤一次，有机相用20g硫酸钠干燥、过滤、旋干，得含氟化合物(Ⅲ)固体26.1g，收率96.3％，直接用于下一步投料。

步骤2：4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(Ⅰ)的制备

将含氟化合物(Ⅲ)(25.0g，32.3mmol)溶于200mL四氢呋喃(THF)中，室温条件下加入四氢吡喃-4-甲胺(5.6g，48.5mmol)和N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)(6.27g，48.5mmol)。升温至60～65℃搅拌反应5小时，TLC检测显示原料反应完毕。反应完毕后减压浓缩，浓缩物加入500mL二氯甲烷搅和200mL纯化水，搅拌后分离出水相，有机相用1％乙酸水溶液150mL洗涤一次，然后再用200mL水洗涤一次，有机相用20g硫酸钠干燥、过滤、旋干，粗品用200mL四氢呋喃重结晶，过滤、干燥得维特克拉精制品(Ⅰ)淡黄色粉末25.1g，收率89.3％。经申请人质谱分析为式Ⅰ结构，经HPLC分析，纯度为99.82％。

主要参考资料

[1]维特克拉体内体外相关性研究

[2]CN201811450340.9一种维特克拉的制备方法及其产品