刺蒺藜皂甙

【背景及概况】^[1][2][3]

刺蒺藜(Tribulus terrestris L.)为蒺藜科蒺藜属植物，一年生草本，一般生于荒丘、田边、路旁，分布于全国各地，长江以北最普遍。该植物为一传统中药，具活血祛风、平肝解郁、明目、止痒功效，用于治疗头痛、头晕、目赤多泪、气管炎、高血压、皮肤瘙痒、风疹等症。

刺蒺藜有效成分包括生物碱类，目前分离出3种生物碱，即哈尔满、哈尔明和哈尔醇；黄酮类，所含黄酮类化合物的苷元主要为槲皮素、山奈酚及异鼠李素；还含有皂甙类，蒺藜的主要有效成分有延龄草苷、薯蓣二葡萄糖苷、薯蓣素、纤细薯蓣苷、原薯蓣苷、原纤细薯蓣苷、蒺藜苷F、新海柯皂甙和Tribulosin等皂甙和薯蓣皂甙元、罗斯考皂甙元、绿莲皂甙元、3-脱氧薯蓣皂甙元、海柯皂甙元等；其他还含有甾醇类，主要含β-谷甾醇、豆甾醇和菜油甾醇；蒺藜根部含有22种游离氨基酸。其它尚含有蒽醌类、糖类、脂肪酸和维生素等。蒺藜及其有效成分具有预防小动脉系统的血栓发生和发展，能提高机体免疫力，提高机体清除氧自由基的能力。对脑血管障碍性病变患者，可减少并发症，减少患者的病残率，缩短康复期，且无不良反应。目前对蒺藜及其有效成分治疗心脑血管系统病变的研究，多以其有效成分刺蒺藜皂甙为主。

【药理作用】^[1]

1. 对性功能的影响

取雄性切除睾丸的幼年大白鼠和雌性摘除卵巢的小白鼠，均以刺蒺藜皂0.16g/kg/d灌胃14d。结果显示，刺蒺藜皂甙不增加去势雄性幼年大白鼠精液囊和前列腺的重量，去卵巢小白鼠的子宫重量亦无变化，表明刺蒺藜皂甙无雄性激素和雌激素样作用。雌性幼年小白鼠，给予刺蒺藜皂甙（0.24g/kg/d×14d）明显增加小白鼠子宫和卵巢的重量，表明刺蒺藜皂甙具有促性腺激素样作用。对切除了垂体的雌性大白鼠，刺蒺藜皂甙不能使其子宫和卵巢的重量增加，提示刺蒺藜皂甙的促性腺激素样作用是依赖垂体而实现的。Tribestan（含刺蒺藜皂甙的制剂）给雌兔喂药能促进情欲，并增强生育能力，无毒性和致畸性。采用小鼠细胞定量法观测表明，其尚能有效的增加小鼠精原细胞、精母细胞及精子细胞的数量，使参与精子形成的塞托利(Sertoli)细胞浓度有所增加。精子生存能力的试验表明，用药组动物精子失活时间比对照组长67%，并且对动物的性欲缺乏及反应延缓有不同程度的改善。

2. 对心肌的作用

对猫和兔可增强心肌收缩力，减慢心率，扩张冠状动脉和外周血管，并显示较强的抗心肌缺血作用和降压作用。家兔灌胃心脑舒通（刺蒺藜皂甙制剂）100mg/kg，用药后血浆中cGMP和cAMP含量明显增加，导致血管舒张、血流量增加，并具有改善周围微循环和组织代谢的作用。　

3. 对脑缺血和心缺氧损伤早期的保护作用　

刺蒺藜皂甙可剂量依赖性地抑制TNF-a（肿瘤坏死因子-a）和IL-1β（白细胞介素1β）的作用，降低E选择素的表达量，从而降低CMEC（牛脑微血管内皮细胞）与PMN（中性粒细胞）及MNC（粘附大鼠单核细胞）的粘附率，显示出对脑缺血再灌注损伤早期的保护作用。IL-1β和TNF-α是机体免疫细胞分泌的细胞因子，能诱导血管内皮细胞表达细胞粘附分子E选择素，它在白细胞与血管内皮细胞粘附而进入炎症部位的过程中起重要作用。在脑缺血再灌注时，细胞因子水平异常升高，E选择素表达量急剧增加。制备大鼠离体心脏缺氧再给氧损伤模型后，用药组的冠脉流出液中的肌酸磷酸激酶保持较低水平，而心肌匀浆中抗氧自由基超氧化歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性明显高，氧自由基的过氧化酯质代谢产物丙二醇含量明显降低。用药组心脏超微结构显示心脑舒通（刺蒺藜皂甙制剂）组的心肌损伤明显轻于对照组，对照组心肌结构破坏严重。证明心脑舒通（刺蒺藜皂甙制剂）对大鼠心脏缺氧再给氧损伤有保护作用。

4. 抗衰老作用　

刺蒺藜水煎剂能明显提高小鼠红细胞的SOD活性、降低MDA含量，提示蒺藜能提高小鼠抗氧化作用，可延缓小鼠红细胞衰老。给D-半乳糖所致亚急性衰老模型小鼠灌胃刺蒺藜皂甙，剂量为240mg/kg和100mg/kg两组，并与人参皂甙比较。结果刺蒺藜皂甙对血胆固醇升高有抑制作用，而胸腺重量明显增加，血糖降低，作用强于人参皂甙。刺蒺藜皂甙明显延长大鼠游泳时间，呈抗疲劳作用。刺蒺藜皂甙能使幼年小鼠胸腺和肝脏的重量明显增加，呈现增强机体免疫功能的作用。脾组织切片显示刺蒺藜皂甙能减少内色素颗粒，改善其聚集程度。给D-半乳糖所致亚急性衰老模型小鼠以刺蒺藜皂甙300mg/kg和150mg/kg两剂量组灌胃，6周后以跳台法和水迷路法测试，发现给药组小鼠记忆功能显著增强。提示刺蒺藜皂甙对机体衰老过程中某些退化性变化有一定的抑制作用，呈现抗衰老作用，并强于人参皂甙。

5. 强壮作用　

蒺藜提取物作为替换物使用能增进蛋白质的合成并维持氮的平衡，有益于肌肉生长和机体强壮。喂食刺蒺藜皂甙 160mg/kg和240mg/kg共8d均能增强小鼠耐高温、低温和缺氧的能力，延长小鼠游泳时间；可降低大鼠肾上腺内维生素C含量，而切除肾上腺后则此作用不再复现。腹腔注射刺蒺藜皂甙50mg/kg共7～ 9d，可抑制注射大剂量氢化可的松所致小鼠“耗竭”现象，又能使处于应激状态的大鼠肾上腺内维生素C的降低得以缓解，显示“双向调节”的作用，可保护肾上腺皮质功能免于衰竭，这可能是实现强壮的途径之一。这种强壮作用与人参相似。

【应用】^[1]

1. 抗动脉粥样硬化

应用Tribusaponin可预防和治疗动脉硬化，可显著改善病人的自觉症状，优于己知的抗动脉硬化药。

2. 对冠心病心绞痛的治疗　

采用三维超声心动图检查冠心病心绞痛患者服用银蒺胶囊（银杏叶与刺蒺藜的复合制剂）前后左心室收缩功能的变化，总有效率为85.7%，左心室射血分数升高，其中收缩早期和晚期射血数均升高，左心室节段收缩率<5%的心肌范围显著降低，说明本药能改善心肌缺血，提高患者左心室收缩早、晚期收缩功能。临床观察证明，心脑舒通（刺蒺藜皂甙制剂）具有扩张冠状动脉，改善冠脉循环，提高耐缺氧的能力，预防垂体后叶及异丙肾上腺素所诱发的缺血性ECG变化，并抑制血小板聚集。还可升高HDL，降低血浆比粘度，促进红细胞在血浆中的运行速度，疏通微循环，进而恢复异常ECG，减轻冠心病心绞痛及胸闷等症状。

3. 脑血管障碍性疾病的治疗　

血液流变性异常是造成脑血供不足和缺氧的原因之一，是反应血液、血管和心脏三者功能和结构变化的综合指标。用心脑舒通（刺蒺藜皂甙制剂）片治疗脑血栓形成30例，Tid，3片/日，4周为一疗程。治疗后总胆固醇和HDL-C均明显降低，血液流变性指标均有所改善，其中全血高切粘度、全血低切粘度、血浆粘度均显著下降。经过7个月的临床验证，总有效率达93.33%。以912-II片（以刺蒺藜皂甙有效成分制成）治疗脑动脉硬化和脑梗塞患者40例，每次45mg，Tid，12周为一疗程，治疗后血清TG、HDL显著下降，全血比粘度、纤维蛋白原Fg、红细胞压积PCV、血小板聚集率也显著下降，同时头痛头晕、胸闷胸痛、心悸等症状也明显改善。表明912-II片能改善血液流变性、调节血小板功能，抗血栓形成，缓解微循环障碍，能显著缓解脑血管障碍患者的临床症状。

4. 对肺心病急性期的治疗　

采用毛细血管粘度仪测定全血比粘度、血浆比粘度、红细胞压积HCT、血沉ESR、红细胞聚积指数，给患者服心脑舒通（刺蒺藜皂甙制剂）30mg，tid，7～ 10d后，各项指标均有所改善，但全血比粘度及聚积指数下降更加明显。部分凝血活酶时间、凝血酶时间显著延长，Fg明显降低。用血栓弹力仪测定反应时间、凝血时间、血栓凝固时间均见显著延长。可见心脑舒通（刺蒺藜皂甙制剂）具有明显降低血液粘稠度、改变血液流变性、降低内源性凝血因子活性、提高抗凝能力的作用，在一定程度上可防治肺心病高凝状态的发生和发展。临床应用也表明本药起效快，作用明显，无明显副作用。

5. 对高血压的治疗　

901片（由刺蒺藜皂甙组方），给30例高血压患者服用100mg，Tid，2月为一疗程。治疗后全血粘度、血浆比粘度、红细胞压积、纤维蛋白原、血小板聚集功能、血甘油三酯均明显下降，临床症状也明显改善。证明901片能改善瘀血症状，改善患者血液流变性，可作为高血压病的治疗药物，对防治中风也有潜在作用。

6. 增强性功能与抗衰老　

Tribestan应用于增加男性精子数及活力，增强女性卵巢功能，治疗性感缺乏症及不孕症，并可预防更年期综合症。心脑舒通（刺蒺藜皂甙制剂）临床试用治疗男性性功能低下症38例，有效率为85.7%。蒺藜提取物可作为一种无激素的能量补剂供运动员使用。

【提取】^[4]

一种从刺蒺藜茎叶中提取刺蒺藜皂甙的方法，包括以下步骤：

1）将刺蒺藜茎叶原料过筛，除去灰土等杂质后粉碎备用； 具体为将刺蒺藜茎叶预先过20目筛，预先除去灰土等杂质。再用锤片粉碎机粉碎至10-20目。这种预处理方法可降低最后成品中无机物的含量。

2）将粉碎后的刺蒺藜茎叶先用清水清洗、后用溶剂法进行提取，得到的提取液减压浓缩，浓缩物备用；具体为清水清洗时用8倍量的清水浸泡1小时，浸泡过程中每15min开启循环一次，每次循环5min，1小时后排出清洗水，起到彻底去除杂质的作用。溶剂提取法优选在以下条件中进行：提取溶剂为乙醇：水70:30，提取温度65-70℃，提取时间2小时，提取2次。提取液浓缩时采用减压浓缩，浓缩时真空度0.04MPa。浓缩到比重为1.15-1.18波美。

3）将浓缩物纯化、干燥既得到高纯度的刺蒺藜皂甙。具体为采用水沉的方式将浓缩物纯化，在浓缩物中加入10-12倍量的水，搅拌15min，后放置5-8小时，待分层后去除上清液。将底层沉淀物浓缩、干燥既得成品。

本发明提取工艺具有提取物成本低廉，提取工艺简单，提取的总皂甙含量高，无机物杂质少等优点，可从刺蒺藜茎叶中提取得到刺蒺藜皂甙90%以上的提取物。工艺流程如下：

【参考文献】

[1] 曹惠玲, 陈浩宏, 许士凯. 蒺藜及其有效成分的药理与临床研究进展[J]. 中成药, 2001, 23(8): 602-605.

[2] 王艳, 陆蕴如. 刺蒺藜化学成分的研究[D]. , 1990.

[3] 刘杰, 陈海生, 徐一新, 等. 中药刺蒺藜化学成分的研究[J]. 第二军医大学学报, 2003, 24(2): 221-222.

[4] 冉小康;马晓东.一种从刺蒺藜茎叶中提取刺蒺藜总皂甙的方法.  CN201410364796.9 ，申请日20140729