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绿原酸

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方法名称

双黄连口服液-绿原酸的含量-高效液相色谱法

仪器设备

仪器设备: 1 仪器
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
C18色谱柱(4mm×25cm,5μm)
2 色谱条件
2.1流动相:甲醇+水+冰醋酸=22+78+1
2.3柱温:室温
2.4流速:1.0ml/min
2.5检测波长:327nm
试样制备: 1.标准溶液的制备
精密称取绿原酸对照品适量,置棕色量瓶中,加50%甲醇制成每1ml含40.02μg的溶2. 供试品溶液的制备
精密量取本品10ml置蒸发皿中水浴蒸干,加50%甲醇适量,超声处理30分钟,置于25ml容量瓶中,用50%甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,弃去初滤液,取续滤液再经0 45μm的微孔滤膜滤过,即得。

应用范围

本方法采用高效液相色谱法测定双黄连口服中绿原酸的含量。
本方法适用于由双花、连翘、黄芩精制而成的双黄连口服液中绿原酸的含量测定。

方法原理

采用高效液相色谱法测定双黄连口服液中绿原酸含量。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇+水+冰醋酸=22+78+1为流动相,流速1.0ml/min,检测波长327nm,柱温为室温。以外标法按峰面积计算含量。

试剂

1. 甲醇(色谱纯)
2. 冰醋酸(分析纯)
3. 三乙胺(分析纯)

试样制备

1.标准溶液的制备
精密称取绿原酸对照品适量,置棕色量瓶中,加50%甲醇制成每1ml含40.02μg的溶2. 供试品溶液的制备
精密量取本品10ml置蒸发皿中水浴蒸干,加50%甲醇适量,超声处理30分钟,置于25ml容量瓶中,用50%甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,弃去初滤液,取续滤液再经0 45μm的微孔滤膜滤过,即得。

操作步骤

1.标准曲线的绘制
精密称取绿原酸对照品适量,置棕色量瓶中,加50%甲醇制成每1ml含40.02μg的溶液作为对照品溶液(10℃以下保存)。精密吸取对照品溶液1.0,2.0,4.0,6.0,8. 0,10.0ml于10ml量瓶中,用50%甲醇稀释至刻度,摇匀。取上述对照品稀释液各10μl,按上述色谱条件测定峰面积,以峰面积为纵坐标,以绿原酸对照品进样量为横坐标作图,通过原点的直线,得回归方程。
2. 供试品的测定
分别取5个批号同上法操作的供试品溶液各10μl进样,记录峰面积积分值,以外标法计算样品中绿原酸含量。