"Namalwa:人Burkitt's淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:悬浮
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
P3X63Ag8细胞类似产品::HEK293A细胞、SCC-7细胞、SNU407细胞
PNEC30细胞类似产品::Ly7细胞、FHC细胞、BCPAP细胞
RPMI.8226细胞类似产品::NCIH250细胞、KYSE 50细胞、KMB 17细胞
Centre Antoine Lacassagne-27细胞类似产品::MDA435细胞、HIT-T15细胞、C17.2细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:这株细胞有EB病毒基因组。
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细胞形态:淋巴母细胞样
Sol8细胞类似产品::RAW2647细胞、Oregon J-111细胞、U-118MG细胞
SUP-T1细胞类似产品::N-2a细胞、A-431细胞、SN12C细胞
C33A细胞类似产品::NCIH1770细胞、HCC2157细胞、Chinese Hamster Ovary细胞
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制HAO的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋HAO冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做HAO标记;6)冻存:在殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
细胞传代方法:1:2传代。3天内可长满。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:悬浮生长
细胞传代后放入培养箱没有摇匀,或者放入时摇匀,但在细胞贴壁前,又移动了培养瓶,频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少,培养箱搁板表面不平整,这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象,大部分悬浮细胞在细胞密度很GAO的情况下,很可能会出现部分细胞抱团生长的现象,聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物,殃及周围的悬浮细胞,因此在培养悬浮细胞时需控制HAO细胞密度。如果出现了细胞团,可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团,也可以尝试一下方法:将细胞悬液收集到15ml离心管中,静置20min左右,小心取上层细胞上清培养(该方法只能去除部分较大的细胞团)。部分细胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐药株等),这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡,则很可能是细胞状态不佳,可以通过调整血清浓度,控制消化,控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态;如果大部分细胞出现空泡,且单个细胞内空泡数目偏多,则可能细胞代次较GAO,细胞老化所致,需更换代次较早的细胞。
OVCAR-5细胞类似产品::R 1610细胞、Lieming Xu-2细胞、VSC4.1细胞
Colo320细胞类似产品::PLC/PRF/5细胞、RBL-I细胞、TERT-RPE1细胞
HT144细胞类似产品::PCI-4.2细胞、COLO829细胞、HEK 293-H细胞
T98 G细胞类似产品::Colon38细胞、MMQ细胞、32D.cl3细胞
Large Cell Lung Cancer-103H细胞类似产品::WPMY-1细胞、A2780CP细胞、NCI-SNU-423细胞
PK-136细胞类似产品::NCI-H1876细胞、NCI-H295细胞、DHL-8细胞
H-1869细胞类似产品::Tb 1-Lu细胞、ES2细胞、EoL-1细胞
SKBr3细胞类似产品::Hs-281-T细胞、HFTF细胞、OAW 42细胞
P3X63-Ag8.653细胞类似产品::8226/S细胞、PC14细胞、OV3121细胞
LIM-1215细胞类似产品::PANC0327细胞、CEMx721.174.T2细胞、GM00637F细胞
NCIH1618细胞类似产品::CFSC-2G细胞、LAN1细胞、KP-N-YN细胞
TOV112细胞类似产品::SKHEP-1细胞、DU145细胞、Hs683细胞
HMCB细胞类似产品::Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MDCKII-WT细胞、NPC-TW 01细胞
NCIH446细胞类似产品::Medical University of Graz-Chordoma 1细胞、Ketr3细胞、HRA 19细胞
NCIH2141细胞类似产品::Large Cell Lung Cancer-103H细胞、BJAB-1细胞、MESSA-DX5细胞
D6P2T细胞类似产品::HFL1细胞、SAS细胞、Hs 675.T细胞
D6P2T细胞类似产品::HFL1细胞、SAS细胞、Hs 675.T细胞
MDA-MB435细胞类似产品::BHK-21细胞、Me-Wo细胞、NCI-H1238细胞
HUVEC-C[HUVEC]细胞类似产品::N1S1细胞、M-07e细胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞
KMST-6细胞类似产品::DF-1细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、NCIH441细胞
HCC0015细胞类似产品::COV434细胞、IBMF-7细胞、IMCD-3细胞
SNU620细胞类似产品::NCI-H196细胞、NCI-H1838细胞、DU-145细胞
H647细胞类似产品::DMS-273细胞、FRhK4细胞、Reuber-H-35 hepatoma细胞
Colo741细胞类似产品::KYSE-410细胞、EnCa1细胞、TE671细胞
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PAEC细胞类似产品::HCT-8/V细胞、293/EBNA-1细胞、2B4-L细胞
MDCK II细胞类似产品::SC1细胞、G-292细胞、130 T细胞
SCC VII细胞类似产品::AN3-CA细胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞、MFE296细胞
BMSCs(mBMSCs)细胞类似产品::U-2OS细胞、Cloudman S91 melanoma细胞、BALB/3T3 (clone A31)细胞
ECC-12细胞类似产品::RCC10细胞、SCL1细胞、Lec1细胞
NCI-SNU-886细胞类似产品::SJSA-1细胞、MGC-803细胞、R 2 C细胞
NOMO1细胞类似产品::Keio University-19-19细胞、Evsa T细胞、Kit 225 K6细胞
Clone Y1细胞类似产品::COR-L23/P细胞、RPE1-hTERT细胞、H1876细胞
BL2141细胞类似产品::CAL148细胞、MOVAS-1细胞、PL 45细胞
MS1细胞类似产品::H1522细胞、MS-751细胞、YES-2细胞
SupB15WT细胞类似产品::H-1944细胞、IGROV 1细胞、ME 180细胞
SCC90细胞类似产品::COLO.205细胞、U-373MG ATCC细胞、W256细胞
SW 954细胞类似产品::A375-S2细胞、Mel526细胞、SUIT 2细胞
16HBE14o-细胞类似产品::Panc 3.27细胞、SGC7901细胞、HeLa/S3细胞
NCIH748细胞类似产品::A375S2细胞、Central Adrenergic TH-expressing a细胞、SUDHL-10细胞
6-T CEM细胞类似产品::1.1B4细胞、TR146细胞、Walker256细胞
NR8383.1细胞类似产品::NCIH520细胞、COC1/CDDP细胞、A2058细胞
HEK-AD293细胞类似产品::KASUMI1细胞、ROS1728细胞、LA-N-5细胞
HSC-6细胞类似产品::PC3M-2B4细胞、OVCAR.8细胞、Ca Ski细胞
HCC-1588细胞类似产品::H-2087细胞、ARH77细胞、KU 19-19细胞
IPLB-Sf21AE细胞类似产品::NCI-H378细胞、NCI-SNU-520细胞、hFOB细胞
NCI-H1954细胞类似产品::TE13细胞、HUT-226细胞、PCI:SG-231细胞
H548细胞类似产品::Jurkat, Clone E6-1细胞、CCD18Co细胞、TSCCa细胞
CL 1-0细胞类似产品::HFT-8810细胞、U373-MG细胞、NCI-H292细胞
ECV 304细胞类似产品::SK-MEL24细胞、NCI-H596细胞、THLE-2细胞
U-2-OS细胞类似产品::AM-38细胞、NCI-H2087细胞、SUM149-PT细胞
Reuber H35细胞类似产品::TC-1[JHU-1]细胞、M-1 myeloid leukemia细胞、JM细胞
A2058细胞类似产品::SW-480细胞、AMC-HN8细胞、A7r5细胞
KTC1细胞类似产品::VMM39细胞、3T3 Swiss Albino细胞、HCC-94细胞
R3/1细胞类似产品::JS1细胞、NK-10A细胞、HSC2细胞
Walker-256-TC细胞类似产品::CWR22R细胞、EFM192细胞、MV(4;11)细胞
L 428细胞类似产品::SNU475细胞、HCC-1833细胞、QGP1细胞
HCEpiC细胞类似产品::C2BBe1细胞、Meat Animal Research Center-145细胞、RFL-6细胞
W256细胞类似产品::HUC细胞、SNU-739细胞、SKMES1细胞
WiDr/S细胞类似产品::WERI-Rb1细胞、MDCK (NBL-2)细胞、Hs-343-T细胞
H.Ep. #2细胞类似产品::H1792细胞、ND7/23细胞、ChaGo-K1细胞
CF Pac1细胞类似产品::bEND.3细胞、TK10细胞、293A细胞
HT144mel细胞类似产品::MDAMB435细胞、RIMEC细胞、Hep3B细胞
HBZY-1细胞类似产品::OCI-AML-3细胞、HSC1细胞、P-388细胞
SHIN-3细胞类似产品::Ball 1细胞、N2a细胞、HTR8细胞
U 937细胞类似产品::EAHY-926细胞、N1S1细胞、HBdSMC细胞
Walker256-TC细胞类似产品::WM239细胞、SW-954细胞、HN4细胞
BHP-10细胞类似产品::SK-Mel 2细胞、FCCH1018细胞、OE33细胞
HEK 293-F细胞类似产品::TR 146细胞、Chang liver细胞、RPMI No. 1846细胞
OVCA-432细胞类似产品::MRC-5细胞、NCI-H209细胞、SCC90细胞
BERH-2细胞类似产品::MM1-S细胞、HL-7702细胞、Roswell Park Memorial Institute 2650细胞
MOLP-8细胞类似产品::Hs 742.T细胞、HSC-4细胞、SNU475细胞
Leukemic 1210细胞类似产品::NCI-H2108细胞、H-1693细胞、Co320细胞
GM07404细胞类似产品::639-V细胞、Pa017C细胞、OCI/AML-5细胞
Onda 11细胞类似产品::SK-N-BE(2)C细胞、GM02219D细胞、COLO206细胞
Ly1细胞类似产品::Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞、Sp2/0细胞、NCIH847细胞
M 1细胞类似产品::32D.cl3细胞、NCIH187细胞、639 V细胞
PLA801C细胞类似产品::MBT-2细胞、CCD-19Lu细胞、Experimental Mammary Tumour-6细胞
HEL-92细胞类似产品::Hs 737.T细胞、NCIH1184细胞、PT-K75细胞
BIC-1细胞类似产品::BALB/c 3T3 clone A31细胞、SW-756细胞、ONS76细胞
Wayne State University-Head and Neck 13细胞类似产品::NU-GC-4细胞、ND7/23细胞、H1792细胞
NCI-H1341细胞类似产品::SNU-407细胞、Case 3细胞、Dysplastic Oral Keratinocyte细胞
NCIH2170细胞类似产品::Karpas-422细胞、Roswell Park Memorial Institute 8226细胞、OCILY7细胞
NCIH2170细胞类似产品::Karpas-422细胞、Roswell Park Memorial Institute 8226细胞、OCILY7细胞
LED-WiDr细胞类似产品::SVOG细胞、H1404细胞、ARO-81细胞
MC-4细胞类似产品::SUIT2细胞、PTK-2细胞、CAL-85-1细胞
SKCO 1细胞类似产品::TE32细胞、JJN3细胞、MDA-MB 231细胞
MUGCHOR1细胞类似产品::no.11细胞、HCCC-9810细胞、WIL2S细胞
MDA231-LM2-4175细胞类似产品::CSQT-2细胞、Leukemia L1210细胞、HCT-FET细胞
Caki-1细胞类似产品::NPA-87细胞、NCIH929细胞、GM-3573细胞
SVOG细胞类似产品::Panc-1-P细胞、HCC94细胞、B10BR细胞
TE-10细胞类似产品::NGEC细胞、SK-N-BE(2)-C细胞、SUPB-15细胞
MDA453细胞类似产品::EMT-6细胞、CEM clone 7细胞、P3/X63-Ag8细胞
MDA-MB361细胞类似产品::DMS-53细胞、LA4细胞、Mouse Podocyte Clone-5细胞
PECAPJ34细胞类似产品::BT细胞、C518细胞、Hs611T细胞
Centre Antoine Lacassagne-33细胞类似产品::Det. 562细胞、MV522细胞、MAC1细胞
CAOV3细胞类似产品::CEL细胞、ACHN细胞、B16-F1细胞
U266细胞类似产品::MV-4-11细胞、H1993细胞、AZ-521细胞
NCI-H716细胞类似产品::GM 637细胞、NT2-D1细胞、PK13细胞
NPC-TW 01细胞类似产品::SK-OV-3细胞、V79-4细胞、BLO11细胞
CLL-CII细胞类似产品::SW13细胞、H-441细胞、D341Med细胞
U266BL细胞类似产品::HP615细胞、RMG1细胞、NOZ细胞
KLE细胞类似产品::Chinese Hamster Ovary细胞、T-CAM2细胞、Madison lung细胞
A549细胞类似产品::D-341Med细胞、38C13细胞、CATHa细胞
SK-UT-1细胞类似产品::TE-14细胞、3-LL细胞、HPAEpiC细胞
SKUT-1细胞类似产品::H-498细胞、Kit225细胞、Ra #1细胞
MHH-CALL-2细胞类似产品::HIEC细胞、KYSE 270细胞、OCI/AML-3细胞
Namalwa:人Burkitt's淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
HCS-2/8细胞类似产品::293 c18细胞、PVEC细胞、GM03570细胞
VB细胞类似产品::NCI-H526细胞、H-2452细胞、CCC-HEH-2细胞
KATOIII细胞类似产品::NCI-841细胞、Z310细胞、NIH:OVCAR-4细胞
H23细胞类似产品::EC-GI细胞、HUSMC细胞、2T细胞
LAN-5细胞类似产品::GA-10细胞、HCC941122细胞、HEM-L细胞
VCaP细胞类似产品::Hs274T细胞、LNCaP-C4-2细胞、SKOV-3细胞
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