"Raji:人Burkitt’s淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:悬浮
有一些细胞是数量多一点比较HAO生长,生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不HAO,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞建议只吹打,不消化)其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Human Embryonic Kidney 293细胞类似产品::My-La 2059细胞、NKL细胞、NKL细胞
LL/2细胞类似产品::MDA-436细胞、TCCPAN2细胞、BEP2D细胞
Tregs细胞类似产品::Epstein-Barr-3细胞、SCC9细胞、SKNBE2细胞
MDCK Type II细胞类似产品::LMH细胞、Michigan Cancer Foundation-12F细胞、HEC-1A细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:Raji细胞由PulvertaftRJV于1963年从一位11岁黑人男孩的左上颌骨的Burkitt淋巴瘤中分离建立的,是个人类造血系统的连续传代细胞,为B细胞起源。该细胞中含有EBV,需要在二级生物安全柜中操作;可作转染宿主。
Raji:人Burkitt’s淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:淋巴母细胞样
T241细胞类似产品::JeKo 1细胞、VMCUB1细胞、MRC5细胞
MDA-MB-134VI细胞类似产品::OCI-AML3细胞、LM-TK-细胞、NCI-H2087细胞
Blotchy fibroblast-11细胞类似产品::Mevo细胞、OCI-AML-3细胞、UMC11细胞
细胞传代培养的胰酶消化法:传代培养:是指细胞从一个培养瓶以1:2或1:2以上的比例转移,接种到另一培养瓶的培养。传代细胞,可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代,部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代,或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤:①入无菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒双手;②倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液37℃下预热;③超净台台面应整洁,用75%酒精棉球擦拭清洁;④打开超净工作台的紫外灯照射台面20min左右,关闭紫外灯,打开风机清洁空气除去臭氧;⑤点燃酒精灯;取出无菌试管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内;⑥将培养用液瓶口用75%酒精消毒,过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上;⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去残留的就培养基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每个大培养瓶加入1ml胰酶,小培养瓶用量酌减,盖HAO瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶,使细胞脱离胰酶,然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鲜培养基,反复吹打消化HAO的细胞使其脱壁并分散,再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成细胞悬液,然后分装到新培养瓶中。盖HAO瓶盖,适度拧紧后稍回转,以利于CO2的进入,将培养瓶放回CO2培养箱;⑩对悬浮培养细胞,步骤7-9不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清,加入新鲜培养基,然后分装到各瓶中。
细胞传代方法:维持细胞浓度在4×105/ml-3×106/ml;根据细胞浓度每2-3天补液1次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
Raji:人Burkitt’s淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:悬浮生长
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
BC-022细胞类似产品::EL-4细胞、COLO 206F细胞、RPMI-7666细胞
SW1783细胞类似产品::HCT-GEO细胞、HuH-1细胞、LNCaP-C4-2细胞
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HEK293-A细胞类似产品::UPCI:SCC154细胞、H-2170细胞、C-4-I细胞
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Kuramochi细胞类似产品::OCI-AML-4细胞、OP9细胞、SNU-C1细胞
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NCI-SNU-C2A细胞类似产品::SU 86.86细胞、TE4细胞、TE4细胞
MO59J细胞类似产品::PIG3细胞、LICR-LON-HN6细胞、TE7细胞
Raji:人Burkitt’s淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
RAG细胞类似产品::HFTF细胞、OSRC2细胞、CD18细胞
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SW 982细胞类似产品::Danio rerio Gill细胞、UWB1.289细胞、WERI-Rb 1细胞
SCC 4细胞类似产品::JTC-39细胞、RSC96细胞、Z-138细胞
HDLM2细胞类似产品::HT-115细胞、HIC细胞、Duke University 4475细胞
Calu-3细胞类似产品::H-378细胞、OP-9细胞、Hs 611.T细胞
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