MDA-MB-436 人乳腺癌细胞系

"MDA-MB-436 人乳腺癌细胞系
细胞背景资料：该细胞源于一名４３岁患有乳腺腺癌女性的胸腔积液。 
细胞形态：上皮细胞样 
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
MDA-MB-436 人乳腺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。 
细胞传代方法：１：２传代，每周换液２—３次 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁生长 
MDA-MB-436 人乳腺癌细胞系
细胞传代培养(消化法)标准操作规程【原理】细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代(再培养)。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。【材料和试剂】１)无菌生理缓冲液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分装于１５ ml无菌离心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回温；３)新鲜培养基；４)无菌吸管/离心管/培养瓶【传代前准备操作】１)预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴锅内预热；２)用７５％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手；３)正确摆放使用的器械：保证足够的操作空间，不仅便于操作而且可减少污染；４)点燃酒精灯：注意火焰不能太小；５)准备好将要使用的消毒后的空培养瓶；６)取出预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内；７)从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞；８)打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。 
细胞形态特性：多角形 
OVHM细胞系相关产品：MV-522细胞、NCIH1963细胞、H9c2(2-1)细胞 
HPAF II细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞、Caki-1细胞、NUGC2细胞 
RPMC细胞系相关产品：RA-FLSs细胞、NeHepLxHT细胞、H2286细胞 
TE85细胞系相关产品：tdott细胞、NCIH208细胞、Hs 840.T细胞 
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Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞系相关产品：EFM19细胞、DHL-2细胞、U937细胞 
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TCCPAN2细胞系相关产品：HLEC细胞、QGP-1细胞、OP9细胞 
Det 562细胞系相关产品：Loucy细胞、G402细胞、NCI-H1882细胞 
NCI-H157细胞系相关产品：Tu 212细胞、SUD4细胞、CAL 12T细胞 
MDA MB 453细胞系相关产品：M-G63细胞、T47D:A细胞、C32-mel细胞 
PLA-801C细胞系相关产品：FHL124细胞、BTT739细胞、PC-3细胞 
BL1339细胞系相关产品：L363细胞、OVISE细胞、H-358细胞 
H128细胞系相关产品：Caco2BBe细胞、MBVP细胞、MGH-U3 (RN)细胞 
C3H/10T1/2 clone 8细胞系相关产品：TE 32细胞、PIG1细胞、RPMI-8402细胞 
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S37细胞系相关产品：HBE135-E6E7细胞、Jurkat, Clone E6-1细胞、NCIH716细胞 
HCEC-B4G12细胞系相关产品：AX-Mel细胞、MNNG细胞、H-1975细胞 
HLE-SRA-01/04细胞系相关产品：Panc2.03细胞、CEMC7细胞、NTera 2细胞 
MDA-MB-436 人乳腺癌细胞系
DMS79细胞系相关产品：RBL-1细胞、SK MES 1细胞、BGC-823细胞 
NCI-H2228细胞系相关产品：HEM细胞、CaES-17细胞、Jiyoye(P-2003)细胞 
HCC366细胞系相关产品：L-363细胞、KYSE70细胞、GM00637H细胞 
NK10a细胞系相关产品：HuTu 80细胞、UMUC14细胞、SN12PM6细胞 
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RC-4B细胞系相关产品：RIN-14B细胞、MDA468细胞、MonoMac1细胞 
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CHP-126细胞系相关产品：OKT 3细胞、CCC-HIE-2细胞、HOC1细胞 
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Embryonic Bovine Tracheal cells细胞系相关产品：NCM460细胞、HNE2细胞、DMS 153细胞 
SCCVII/St细胞系相关产品：Panc-327细胞、LNCaP-ATCC细胞、LS 180细胞 
OB2细胞系相关产品：Lieming Xu-2细胞、OCI/AML4细胞、A2780细胞 
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HCC2935细胞系相关产品：GLC82细胞、L5178Y TK+/-3.7.2c细胞、OC-3-VGH细胞 
UMNSAH/DF#1细胞系相关产品：SUM 149细胞、HELF细胞、IEC-18细胞 
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞系相关产品：FU-97细胞、OCM-1细胞、WM-451Lu细胞 
RGM-1细胞系相关产品：RCC_7860细胞、MDA436细胞、HCC-1143细胞 
MDA-MB-436 人乳腺癌细胞系
SVEC4-10细胞系相关产品：Hx147细胞、CORL88细胞、Hs 729.T细胞 
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T 98 G细胞系相关产品：FHs74Int细胞、MLA144细胞、MPC-83细胞 
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