"HEK293T/17 Cell:人胚肾细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:胚肾;5型腺病毒及SV40转化;女性
RCC-10细胞系相关产品:SKCO-1细胞、OCI-Ly 18细胞、NCIH1355细胞
NHDF细胞系相关产品:CAL 33细胞、UCLA-SO-M21细胞、D341 Med细胞
MCA205细胞系相关产品:JB-6细胞、COLO 320DM细胞、293c18细胞
SKHEP1细胞系相关产品:Rat 1细胞、Human Liver-7702细胞、KHYG1细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HEK293T/17 Cell:人胚肾细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
OKAC1细胞系相关产品:P3JHR1细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、MC57细胞
Madin Darby Bovine Kidney细胞系相关产品:LU65细胞、JB6 [Mouse]细胞、H1623细胞
COLO-320细胞系相关产品:AML-12细胞、LLCMK2细胞、SSP-25细胞
H-1876细胞系相关产品:DHL-6细胞、SNU-182细胞、AML-193细胞
C12细胞系相关产品:DLM8细胞、TE13细胞、RPMI-8226细胞
细胞生长特性:贴壁
HEK293T/17 Cell:人胚肾细胞系
贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉!
细胞形态特性:详见细胞说明书
Sarcoma OSteogenic-2细胞系相关产品:8305C_1细胞、MZ-CRC-1细胞、MC116细胞
HCC95细胞系相关产品:RN-c细胞、Neuro-2a细胞、SV-HUC细胞
L-5178-Y-R细胞系相关产品:WPE-int细胞、SW260细胞、OUMS23细胞
CD18/HPAF细胞系相关产品:NB-9细胞、RL95-2细胞、Chinese Hamster Lung细胞
M-07e细胞系相关产品:KP-2细胞、TGW-nu-1细胞、NCI-H2108细胞
JB 6细胞系相关产品:H1417细胞、16-HBE细胞、FC33细胞
SKMES1细胞系相关产品:MG63细胞、NU-GC-4细胞、SW-982细胞
HEK293T/17 Cell:人胚肾细胞系
MEL细胞系相关产品:RS411细胞、QGP1细胞、TE 85 ClF-5细胞
MKN 28细胞系相关产品:AG06814-N细胞、RPMI #1846细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞
A431/P细胞系相关产品:NCIH2135细胞、MCF12F细胞、LMTK-细胞
Molm 14细胞系相关产品:M-O7e细胞、HCO细胞、38C-13细胞
Z-138细胞系相关产品:H838细胞、LNCaP-FGC细胞、D283 Med细胞
H7721细胞系相关产品:OCI-Ly 18细胞、NCIH2073细胞、PY8119细胞
MDA-MB157细胞系相关产品:hUC-MSC细胞、CZ-1细胞、SUM-102细胞
MDA-MB-435 S细胞系相关产品:MDA231-LM2细胞、DHL6细胞、INS1E细胞
Ly7细胞系相关产品:CBRH-7919细胞、H-748细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞
Ly7细胞系相关产品:CBRH-7919细胞、H-748细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞
X63Ag8.653细胞系相关产品:HT144mel细胞、Leydig细胞、SW-962细胞
FRTL-5 Cl 2细胞系相关产品:P3X63Ag8.653细胞、HUCEC细胞、MCF-7/AdrR细胞
H-69细胞系相关产品:VK2 (E6/E7)细胞、E304细胞、NCI-H1048细胞
KOSC-2 cl3-43细胞系相关产品:Calu6细胞、MDCC-MSB1细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞
MPC-83细胞系相关产品:PL9细胞、MC 116细胞、H1355细胞
LN 382细胞系相关产品:SK-N-FI细胞、T98G细胞、HuNS1细胞
SW1271细胞系相关产品:BT325细胞、P3X63 AG8-653细胞、3T3L1细胞
NKL细胞系相关产品:Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞、C4-2 B细胞、SW 1222细胞
PC-12细胞系相关产品:SW-13细胞、P3X63NS1细胞、KM933细胞
AGS细胞系相关产品:Glioma 261细胞、B 95.8细胞、H-596细胞
W256细胞系相关产品:HUC细胞、SNU-739细胞、SKMES1细胞
Pa14C细胞系相关产品:DLD 1细胞、HL7702细胞、RPMI no. 8226细胞
HLEC-B3细胞系相关产品:MOLT 16细胞、BN-CL2细胞、MTEC1细胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞系相关产品:QBC(939)细胞、JB 6细胞、HIT T15细胞
SUDHL-10细胞系相关产品:MDCC-MSB-1细胞、HPAC细胞、MDA-MB415细胞
RKO_AS45细胞系相关产品:NCL-H548细胞、X63-Ag8.653细胞、Saos2细胞
P3-NS1/1-Ag4-1细胞系相关产品:NHLF细胞、NCI-H524细胞、Caco 2细胞
SO-RB50细胞系相关产品:U118-MG细胞、NP69SV40T细胞、H-660细胞
beta TC6细胞系相关产品:RPMI1788细胞、HUVEC-C[HUVEC]细胞、STTG1细胞
MDA MB 134VI细胞系相关产品:KYSE410细胞、DHL-4细胞、PK-136细胞
FL 62891细胞系相关产品:HL60细胞、NCI-SNU-216细胞、KPL-1细胞
MUM2B细胞系相关产品:EL4细胞、H-187细胞、KP-N-RT-BM-1细胞
COR-L51细胞系相关产品:C26细胞、MC/9细胞、LM8细胞
HEK293-F细胞系相关产品:P3-X63Ag8.653细胞、SKG3A细胞、B4G12细胞
EC-9706细胞系相关产品:LTEP-s细胞、BaF3细胞、G292细胞
PNT1-a细胞系相关产品:DHL4细胞、GC-1细胞、MSTO-211细胞
Tu686细胞系相关产品:UCLA-RO 81细胞、SUM102细胞、RPMI8402细胞
TE 671细胞系相关产品:SCC15细胞、RT4细胞、SACCLM细胞
VMM-5A细胞系相关产品:CC-LP-I细胞、AtT20细胞、PL-9细胞
GL261细胞系相关产品:GM02131细胞、SK-N-MC细胞、HuH-1细胞
BERH-2细胞系相关产品:MM1-S细胞、HL-7702细胞、Roswell Park Memorial Institute 2650细胞
Super Tube细胞系相关产品:SCCVII/St细胞、COR-L23/P细胞、TE5细胞
AR4-IP细胞系相关产品:S3 HeLa细胞、Scott and White No. 13细胞、Rat Fetal Lung-6细胞
HEK293T/17 Cell:人胚肾细胞系
W133细胞系相关产品:HN 4细胞、UPCISCC090细胞、Sp2/0细胞
RS1细胞系相关产品:HT 144细胞、MSTO-211细胞、Namalwa细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞系相关产品:HIBEpiC细胞、HRA19细胞、P3 NS1 Ag4/1细胞
L5178Y细胞系相关产品:Transformed Human Liver Epithelial-3细胞、J774.A1细胞、PL-5细胞
PASMCS细胞系相关产品:138MG细胞、P3 88 D1细胞、DLD1细胞
NCI-H2029细胞系相关产品:Ku812细胞、P30 OHK细胞、SK-NEP-1细胞
MDAMB134VI细胞系相关产品:R2C细胞、HCC0015细胞、RPMI 1846细胞
RSMC细胞系相关产品:SU-DH-L5细胞、TKB1细胞、UWB1.289细胞
Scott and White No. 13细胞系相关产品:NCI-H735细胞、MCF-7ADR细胞、NCIH740细胞
HS-445细胞系相关产品:PC.3细胞、HLE-SRA-01/04细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞
PASMCS细胞系相关产品:138MG细胞、P3 88 D1细胞、DLD1细胞
H-1944细胞系相关产品:SNB.19细胞、NPA 87细胞、H226细胞
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