"A101D Cell:人黑色素瘤细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
H647ell细胞系相关产品:SMMC-7721细胞、C3H10T1/2细胞、OCIAML4细胞
B 95.8细胞系相关产品:NS20Y细胞、KBM5细胞、HFE-145细胞
NU-GC-3细胞系相关产品:MGC803细胞、ACCM细胞、MC 116细胞
Eca109细胞系相关产品:H283细胞、B104 [Rat neuroblastoma]细胞、H1341细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
A101D Cell:人黑色素瘤细胞系
如何把细胞养的形态更好更漂亮。1.不同的细胞,喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同,还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不好,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞我们只吹打,不消化的);其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。3.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。(可能也是竞争很大,有优胜劣汰吧。呵呵。)对于生长速度快的细胞,易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。4.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞,在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态,比玻璃瓶会好,对于生长速度慢的细胞,玻璃瓶则会更好。同样,对于同一种细胞,在其生长速度慢的时候,会好一点,比如刚刚复苏的时候,或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候,玻璃瓶则相对会好一点。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:4-1:6传代,2-3天换液1次。
为什么培养的细胞要及时传代?体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性,也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候,它就会停止生长,及时传代后,细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些?可能的原因有:更换了不同的培养液或血清;培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏;培养物中有少量细菌或真菌污染;试剂保存不当;比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清等,找出其它可能的原因。解决办法:增加起始培养细胞浓度;让细胞逐渐适应新培养液;换入新鲜配制培养液;补加谷酷肢或生长因子等;用无抗生素培养液培养,如发现污染,去弃培养物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培养液需在2-8℃避光保存;含血清完全培养液在2-8℃保存,并在2周内用完;分离培养物,检测支原体。冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后,须立即放入37℃水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1-2分钟内大部分融化,特别注意,需残留一小块冰块,就可拿到超净工作台操作细胞,用75%酒精消毒冻存管,用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管爆裂。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Hs739T细胞系相关产品:OCI-Ly 7细胞、B-cell with DC Morphology细胞、H-2171细胞
H-295R细胞系相关产品:SNU-182细胞、HCMEC细胞、UCH1细胞
PA-TU S细胞系相关产品:NCI-H322T细胞、IMR 32细胞、NCI-ADR-RES细胞
HOCF细胞系相关产品:Psi2-DAP细胞、RPMI1788细胞、Clone Y1细胞
PCI:SG-231细胞系相关产品:SK-ES1细胞、Hs 27细胞、Hs 706.T细胞
细胞生长特性:贴壁生长
A101D Cell:人黑色素瘤细胞系
细胞冻存复苏材料与方法步骤:常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器,规格有35L和50L两种。使用时要注意以下几点:(1)一般两周需充液氮一次,至少一个月充氮一次。液氮温度达-196℃,使用时注意勿让液氮溅到皮肤上,以免引起冻伤。(2)液氮容器为双层结构,中间为真空层,瓶口有双层焊接处,应防止焊接部裂开。(3)在装入液氮时,要注意缓慢小心,并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导,使液氮直达瓶底,如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用,加液氮时更要缓慢,以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培养液,DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(121°C蒸气高压消毒),2mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为:(1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为3×106~1×107/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中,安瓿装1~1.5mL在火焰喷灯上封口,封口处要完全封闭,圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜,次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤:先将安瓿置入4℃冰箱中2~3小时,再移至冰箱冷冻室内3~4小时,再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时,最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只安瓿细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
细胞形态特性:上皮细胞
201T细胞系相关产品:Fetal Bovine Heart Endothelial细胞、KALS-1细胞、MDBK (NBL-1)细胞
MDA-436细胞系相关产品:RKOAS451细胞、BNL-CL.2细胞、HUT28细胞
OVCAR-5细胞系相关产品:R 1610细胞、Lieming Xu-2细胞、VSC4.1细胞
S3-HeLa细胞系相关产品:Hi-five细胞、RPTEC/TERT 1细胞、HNTEC细胞
UC-3细胞系相关产品:HCFB(HCF)细胞、NCIH650细胞、DH-82细胞
A-2780细胞系相关产品:H9c2细胞、SCL-2细胞、BALL1细胞
RA-FLSs细胞系相关产品:HCC0044细胞、ZR75-30细胞、L6细胞
A101D Cell:人黑色素瘤细胞系
NCI-H128细胞系相关产品:UO.31细胞、YTMLC-90细胞、GM03573A细胞
BNL.CL2细胞系相关产品:TFK-1细胞、MA-104细胞、NCIH244细胞
SW 1417细胞系相关产品:OB2细胞、SKMEL1细胞、U-2 OS细胞
GM16136细胞系相关产品:RGM1细胞、MUS-M1细胞、C3H10T1-2细胞
Colo-201细胞系相关产品:NK-92 MI细胞、BEL 7404细胞、Ha Fe细胞
OCI-LY-8细胞系相关产品:SKO007细胞、NCI-H2591细胞、HOP-62细胞
OCI-Ly 1细胞系相关产品:TE8细胞、RGCs细胞、A549 ATCC细胞
NK 10a细胞系相关产品:NCIH1734细胞、alpha TC1.6细胞、MPP-89细胞
BC-023细胞系相关产品:PL5细胞、COLO320HSR细胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞
BC-023细胞系相关产品:PL5细胞、COLO320HSR细胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞
CORL105细胞系相关产品:HT-29细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞、MDA-MB 361细胞
8402细胞系相关产品:VMCUB1细胞、BMDC细胞、WM 2664细胞
MDAMB435S细胞系相关产品:Caco-2/BBe 1细胞、TOV21细胞、NCI-SNU-520细胞
L-5178-Y细胞系相关产品:Clone 929细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、GM03569D细胞
NCI-H292细胞系相关产品:FC33细胞、GM04671细胞、Eca-109细胞
NCI-H2196细胞系相关产品:MA-104细胞、6-10B细胞、H-1915细胞
PZ-HPV-7细胞系相关产品:NCI-SNU-216细胞、174xCEM.T2细胞、HEK-293FT细胞
P3 NS1 Ag4细胞系相关产品:Hs 706.T细胞、National Medical Center-Glioma 1细胞、RCC-10细胞
Dami细胞系相关产品:H-1954细胞、SK-NMC细胞、U-138MG细胞
KYSE50细胞系相关产品:HMVEC细胞、OCI-Ly10细胞、EJ-1细胞
OCI-Ly 19细胞系相关产品:SK-HEP-1细胞、UCLA RO-81-A-1细胞、J 82细胞
NCCIT细胞系相关产品:L-929细胞、Ca Ski细胞、NPC-TW01细胞
EBNA293细胞系相关产品:HSC-I细胞、OV-1063细胞、MiaPaCa2细胞
MPC5细胞系相关产品:COLO-HSR细胞、CCRF.CEM细胞、H-2052细胞
HPAC细胞系相关产品:JVM-3细胞、H2198细胞、YES2细胞
HLE-B3细胞系相关产品:2PK-3细胞、HTSMC细胞、RPE-hTERT细胞
SR786细胞系相关产品:NOR-10细胞、NCIH1944细胞、639-V细胞
NT2细胞系相关产品:T1-73细胞、C 643细胞、NFHIOSE-80细胞
MCA 205细胞系相关产品:SW 1417细胞、Vero-E6细胞、SCL1细胞
MDAMB453细胞系相关产品:MDA-MB-436细胞、H-1651细胞、SK-ML2细胞
CL34细胞系相关产品:HuP-T4细胞、RCCJF细胞、OCI AML3细胞
RBMVEC细胞系相关产品:DoTc2 4510细胞、G401细胞、IPLB-SF-21-AE细胞
PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞系相关产品:MOLT 4细胞、Swiss-3T3细胞、H-2087细胞
COLO 678细胞系相关产品:OVCA-432细胞、NCIH295R细胞、Panc-1-P细胞
D 407细胞系相关产品:HCT 15细胞、293 HEK细胞、ECC12细胞
PC-10细胞系相关产品:NCI-HUT-69细胞、NCIH2591细胞、P3X63NS1细胞
H-2196细胞系相关产品:HTori 3细胞、PANC3.27细胞、C1R细胞
OCILY-19细胞系相关产品:HLEB3细胞、SUM149细胞、CV-1细胞
Panc 03.27细胞系相关产品:Scott细胞、PANC-04-03细胞、MAVER1细胞
SKNFI细胞系相关产品:Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞、NCI-H1155细胞、WBF344细胞
RGC6细胞系相关产品:SF-295细胞、MFE 296细胞、KYSE 180细胞
THLE-3细胞系相关产品:Human podocyte细胞、SKMES细胞、95D细胞
KHYG-1细胞系相关产品:Y3细胞、GM00346细胞、BALB 3T3 clone A31细胞
A101D Cell:人黑色素瘤细胞系
KTC1细胞系相关产品:VMM39细胞、3T3 Swiss Albino细胞、HCC-94细胞
NCI-SNU-C1细胞系相关产品:SH-SY5Y细胞、HeLa S3细胞、PC-9/GR细胞
FUOV1细胞系相关产品:COLO320 DM细胞、MonoMac 6细胞、MNNGHOS细胞
P30-OHK细胞系相关产品:MDA468细胞、KU812-F细胞、H441细胞
JB 6细胞系相关产品:H1417细胞、16-HBE细胞、FC33细胞
RS 4;11细胞系相关产品:MPC5细胞、H-1404细胞、D-341 Med细胞
HEK-AD 293细胞系相关产品:H184A1细胞、M059K细胞、CNLMG-B5537SKIN细胞
NS20-Y细胞系相关产品:F442-A细胞、HeLa229细胞、FM-88细胞
ECC-10细胞系相关产品:LICR-LON-HN6-R细胞、Z138细胞、MDA-MB436细胞
LN299细胞系相关产品:Rat1细胞、ROS 17/28细胞、EB-1细胞
CAL-12T细胞系相关产品:BEL-7404细胞、RF/6A细胞、NCI-HUT-292细胞
HCC-78细胞系相关产品:H358细胞、Pt K1 (NBL-3)细胞、NRK-49F细胞
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