人黑色素瘤细胞；A375.S2 (STR)

产品信息：

人黑色素瘤细胞A375.S2是一种广泛研究的细胞系，源自恶性黑色素瘤患者。

细胞特性：

来源：A375.S2细胞系来源于一位54岁女性恶性黑色素瘤患者的皮肤组织。

形态：上皮细胞样形态，贴壁生长。

生长特性：贴壁生长，倍增时间约为24-32小时。

遗传特征：具有亚三倍体核型，常见NRAS突变，是研究黑色素瘤的重要模型。

应用：常用于肿瘤生物学、药物筛选、毒理学研究及免疫肿瘤学研究。

培养操作：

培养基：通常使用DMEM培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素溶液。

培养条件：37℃、5% CO₂、饱和湿度环境。

传代比例：建议1:2至1:4传代，细胞密度达80%-90%时进行传代。

冻存条件：使用90%血清 + 10%DMSO的冻存液，程序降温至-80℃过夜后转入液氮储存。

复苏与传代步骤：

复苏细胞：

将冻存管在37℃水浴中迅速解冻，加入预热的完全培养基，离心（1000RPM，3-5分钟）。

弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，接种至T25培养瓶中，37℃培养箱培养过夜。

传代培养：

弃去旧培养基，用PBS润洗细胞1-2次。

加入胰酶-EDTA溶液消化细胞，显微镜下观察细胞变圆并脱落时，加入含血清的培养基终止消化。

离心后重悬细胞，按1:2至1:4比例分瓶继续培养。

注意事项：

定期进行STR鉴定，确保细胞系的遗传稳定性。

操作过程中需注意无菌操作，避免细胞污染。

A375.S2细胞在消化过程中需控制胰酶消化时间，避免过度消化影响细胞贴壁和生长。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织

注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。