小鼠VEGF elisa试剂盒

检测原理：

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗小鼠 VEGF抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，经过孵育，样本中存在的VEGF与固相抗体和检测抗体结合，形成免疫复合物。洗涤去除未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。洗涤后，加入显色底物，避光显色。加入终止液终止反应，在450 nm波长(参考校正波长540nm或570nm)测定吸光度值。

检测类型：双抗夹心法

形式：预包被96孔板

检测样本类型：细胞上清液，血清，血浆

上样量：100ul

试剂盒组分：

预包被96孔板、标准品、抗小鼠 VEGF检测抗体、稀释用缓冲液、显色液（A、B）、洗涤液、终止液、SA-HRP、封板膜和说明书一份。

灵敏度：1.8 pg/mL

检测范围：15.6 - 1,000 pg/mL

回收率范围：82-110%

保存方法：2-8℃

标准曲线图

背景：

血管内皮生长因子(VEGF 或 VEGF-A)，又叫血管通透因子(VPF)，是一种针对胎儿和成 人的血管新生和血管生成的有效调节因子。血管内皮生长因子属于 PDGF 家族，该 家族蛋白的特点是存在 8 个保守的胱氨酸结点和通过反向平行二硫键结合的二聚体(4)。 经过选择性剪切，VEGF 剪接体有不同的氨基酸长度。小鼠有 VEGF120、VEGF164、 VEGF188；人的 VEGF 有 VEGF121、VEGF145、VEGF164、VEGF183、VEGF189 和 VEGF206。VEGF165 是人的表达量最高、活性最强的一种亚型，其次是 VEGF121 和 VEGF89。小鼠也许是同样情况。除 VEGF120 和 VEGF121 外，VEGF 的其 他亚型都含有基本的肝素结合区域，且不能自由扩散。小鼠 VEGF164 与相应的大 鼠蛋白氨基酸享有 97%的同源性;与人或猪的 VEGF 同源性为 89%，与牛 VEGF 同源性 为 88%，与猫、马及犬的 VEGF 的同源性为 90%。VEGF 在多种细胞和组织中表达，包 括骨骼肌和心肌细胞、肝细胞、成骨细胞、中性粒细胞、巨噬细胞、角质形成细胞、棕色脂肪细胞、CD34⁺ 干细胞、内皮细胞、成纤维素细胞、血管平滑肌细胞等等。VEGF 的表达受到缺氧和细胞因子的诱导，包括 IL-1、IL-6、IL-8、抑瘤素 M（oncostatin M）和肿瘤坏死因子α等。在发育过程和成体中，VEGF 亚型的表达也是不同的。

VEGF 的二聚体与两个相关的酪氨酸激酶受体相结合，即 VEGF R1(也叫 FLt-1) 和 VEGF R2(Flk-1/KDR) 。VEGF 与受体的结合可诱导后者同型二聚体化和自磷酸化。这些受体拥有 7 个胞外的类免疫球蛋白域。血管内皮细胞和一些非内 皮细胞都有 VEGF 受体的表达。尽管 VEGF 与 VEGF R1 的亲和力最高，但 VEGF R2 却是调控 VEGF 的血管生产活性的主要因子。VEGF165 也结合臂板蛋白（semaphoring）受体、神经纤毛蛋白 1（neuropilin-1），由此促进与 VEGF R2 的复合体形成。

VEGF 因其参与血管生成而著称。在胚胎发育过程中，VEGF 调控内皮细胞的增殖、 迁移和生存，并由此调控血管的密度、体积，但对于血管形成的格局并不起作 用。VEGF 通过成骨细胞和软骨细胞的招募促进骨骼的形成，它同时也是一个单核细胞 趋化因子。在产后，VEGF 维持血管内皮细胞的完整性, 并且是大/小血管内皮 细胞的有效丝裂剂。在成体中，VEGF 主要在伤口修复和女性的生殖周期发挥作用。 在疾病组织中，VEGF 促进血管的通透性。因此，VEGF 通过促进外渗和肿瘤血管生成， 参与了肿瘤的转移过程。针对阻断 VEGF 活性的各种治疗策略正在被用于控 制由 VEGF 诱导的肿瘤血管生成。体内循环的 VEGF 水平与自身免疫行疾病（如类 风湿关节炎、多发性硬化症、系统性红斑狼疮）的病征程度相关。