人VEGF elisa试剂盒

检测原理：

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人VEGF抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，经过孵育，样本中存在的VEGF与固相抗体和检测抗体结合，形成免疫复合物。洗涤去除未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。洗涤后，加入显色底物，避光显色。加入终止液终止反应，在450 nm波长(参考校正波长540nm或570nm)测定吸光度值。

检测类型：双抗夹心法

形式：预包被96孔板

检测样本类型：细胞上清液，血清，血浆

上样量：100ul

试剂盒组分：

预包被96孔板、标准品、VEGF检测抗体、稀释用缓冲液、显色液（A、B）、洗涤液、终止液、SA-HRP、封板膜和说明书一份。

灵敏度：7.8pg/mL

检测范围：31.2 - 2,000 pg/mL

回收率范围：113-135%

保存方法：2-8℃

标准曲线图

背景：

血管内皮生长因子（VEGF或VEGF-A）又叫血管通透因子，是一种针对胎儿和成人的血管新生和血管生成的有效调节因子。血管内皮生长因子属于PDGF家族，该家族蛋白的特点是在胱氨酸结和通过反向平行二硫键结合的二聚体的结构处，存在8个保守的胱氨酸残基。经过选择性剪切和氨基酸的序列长度，人类表达不同的亚型，包括：VEGF121、VEGF145、VEGF165、VEGF183、VEGF189和VEGF206等等。其中VEGF165是表达量最高的一种亚型，其次是VEGF121和VEGF189。除了VEGF121，其它的亚型都包含了基本的肝素结合区域且不能自由扩散。人类的VEGF165与小鼠和大鼠的相应的蛋白氨基酸序列同源性为88%。VEGF在各种细胞和组织中表达，包括骨骼肌细胞和心肌细胞、肝细胞、成骨细胞、中性粒细胞、巨噬细胞、角质形成细胞、棕色脂肪细胞、CD34+干细胞、内皮细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细胞等等。VEGF的表达收到缺氧和细胞因子的诱导，包括IL-1、IL-6、IL-8、抑瘤素M和肿瘤坏死因子α等。在发育过程和成体中，VEGF的表达量也是不同的。

VEGF的二聚体与2个相关的酪氨酸激酶受体相结合，即VEGF R1（也叫Flt-1）和VEGF R2（Flk-1/KDR）。VEGF同时可以诱导后者的同型二聚体和自磷酸化过程。这些受体拥有7个胞外的免疫球蛋白的域和一个胞内分开的酪氨酸受体域。血管内皮细胞和其它一些非内皮细胞都表达VEGF受体。尽管VEGF与VEGF R1的亲和力最高，但VEGF R2却是调控VEGF的血管生成的主要因子。VEGF165也结合臂板蛋白（semaporin）受体，神经纤毛蛋白1（neuropilin-1），由此促进与VEGF R2的复合体形成。

VEGF因其参与血管生成而著称。在胚胎发育过程中，VEGF调控内皮细胞的增殖、迁移和生存，并由此调控血管的密度、体积；但对于血管形成的格局并不起作用。VEGF通过成骨细胞和软骨细胞的招募促进骨骼的形成，它同时也是一个单核细胞趋化因子。在产后，VEGF维持血管内皮细胞的完整性，并且是大/小血管内皮细胞的有效丝裂原。在成体中，VEGF主要在伤口修复和女性的生殖周期发挥作用。在疾病组织当中，VEGF促进血管的通透性。因此，VEGF通过外渗和肿瘤血管生成参与了肿瘤的转移过程。针对阻断VEGF活性的各种治疗策略正在被用于控制由VEGF诱导的肿瘤血管生成。体内循环的VEGF水平与自身免疫性疾病（如类风湿关节炎、多发性硬化症、系统性红斑狼疮等）的病症程度相关。