| 产品编号 |
产品名称 |
产品包装 |
产品价格 |
| D2705-100μg |
pCMV-N-DsRed (红色荧光蛋白) |
100μg |
1086.00元 |
pCMV-N-DsRed是碧云天自行研发的哺乳动物细胞表达质粒，用于表达N端含DsRed (Discosoma sp. red fluorescent protein，香菇珊瑚红色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个DsRed的完整编码序列，并且在DsRed前面加入Kozak序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有DsRed标签的融合蛋白。利用DsRed的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用DsRed抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。DsRed与GFP没有序列同源性，不能使用GFP抗体检测DsRed。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-N-DsRed质粒的主要信息如下：
|
Feature Nucleotide
|
Position
|
|
CMV promoter
|
1-602
|
|
T3 promoter and T3 primer binding site
|
620-639
|
|
Kozak sepuence
|
656-662
|
|
DsRed
|
663-1337
|
|
Multiple cloning site
|
1338-1403
|
|
T7 promoter and T7 primer binding site
|
1446-1468
|
|
SV40 polyA signal
|
1481-1863
|
|
f1 origin of ss-DNA replication
|
2001-2307
|
|
bla promoter
|
2332-2451
|
|
SV40 promoter
|
2476-2814
|
|
Neomycin/kanamycin resistance ORF
|
2849-3641
|
|
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
|
3642-4099
|
|
pUC origin
|
4226-4892
|
pCMV-N-DsRed质粒(4947bp)的图谱如下：
pCMV-N-DsRed的多克隆位点的详细图谱如下：
|
SacI Kozak DsRedM
|
|
|
|
651
|
GAGCTCGCCA
|
|
CACCGAGGAC
|
GTCATCAAGG
|
AGTTCATGCA
|
|
|
|
|
CTCGAGCGGT
|
|
GTGGCTCCTG
|
CAGTAGTTCC
|
TCAAGTACGT
|
|
|
|
701
|
GTTCAAGGTG
|
CGCATGGAGG
|
GCTCCGTGAA
|
CGGCCACTAC
|
TTCGAGATCG
|
|
|
|
|
CAAGTTCCAC
|
GCGTACCTCC
|
CGAGGCACTT
|
GCCGGTGATG
|
AAGCTCTAGC
|
|
|
|
751
|
AGGGCGAGGG
|
CGAGGGCAAG
|
CCCTACGAGG
|
GCACCCAGAC
|
CGCCAAGCTG
|
|
|
|
|
TCCCGCTCCC
|
GCTCCCGTTC
|
GGGATGCTCC
|
CGTGGGTCTG
|
GCGGTTCGAC
|
|
|
|
801
|
CAGGTGACCA
|
AGGGCGGCCC
|
CCTGCCCTTC
|
GCCTGGGACA
|
TCCTGTCCCC
|
|
|
|
|
GTCCACTGGT
|
TCCCGCCGGG
|
GGACGGGAAG
|
CGGACCCTGT
|
AGGACAGGGG
|
|
|
|
851
|
CCAGTTCCAG
|
TACGGCTCCA
|
AGGCCTACGT
|
GAAGCACCCC
|
GCCGACATCC
|
|
|
|
|
GGTCAAGGTC
|
ATGCCGAGGT
|
TCCGGATGCA
|
CTTCGTGGGG
|
CGGCTGTAGG
|
|
|
|
901
|
CCGACTACAT
|
GAAGCTGTCC
|
TTCCCCGAGG
|
GCTTCACCTG
|
GGAGCGCTCC
|
|
|
|
|
GGCTGATGTA
|
CTTCGACAGG
|
AAGGGGCTCC
|
CGAAGTGGAC
|
CCTCGCGAGG
|
|
|
|
951
|
ATGAACTTCG
|
AGGACGGCGG
|
CGTGGTGGAG
|
GTGCAGCAGG
|
ACTCCTCCCT
|
|
|
|
|
TACTTGAAGC
|
TCCTGCCGCC
|
GCACCACCTC
|
CACGTCGTCC
|
TGAGGAGGGA
|
|
|
|
1001
|
GCAGGACGGC
|
ACCTTCATCT
|
ACAAGGTGAA
|
GTTCAAGGGC
|
GTGAACTTCC
|
|
|
|
|
CGTCCTGCCG
|
TGGAAGTAGA
|
TGTTCCACTT
|
CAAGTTCCCG
|
CACTTGAAGG
|
|
|
|
1051
|
CCGCCGACGG
|
CCCCGTAATG
|
CAGAAGAAGA
|
CTGCCGGCTG
|
GGAGCCCTCC
|
|
|
|
|
GGCGGCTGCC
|
GGGGCATTAC
|
GTCTTCTTCT
|
GACGGCCGAC
|
CCTCGGGAGG
|
|
|
|
1101
|
ACCGAGAAGC
|
TGTACCCCCA
|
GGACGGCGTG
|
CTGAAGGGCG
|
AGATCTCCCA
|
|
|
|
|
TGGCTCTTCG
|
ACATGGGGGT
|
CCTGCCGCAC
|
GACTTCCCGC
|
TCTAGAGGGT
|
|
|
|
1151
|
CGCCCTGAAG
|
CTGAAGGACG
|
GCGGCCACTA
|
CACCTGCGAC
|
TTCAAGACCG
|
|
|
|
|
GCGGGACTTC
|
GACTTCCTGC
|
CGCCGGTGAT
|
GTGGACGCTG
|
AAGTTCTGGC
|
|
|
|
1201
|
TGTACAAGGC
|
CAAGAAGCCC
|
GTGCAGCTGC
|
CCGGCAACCA
|
CTACGTGGAC
|
|
|
|
|
ACATGTTCCG
|
GTTCTTCGGG
|
CACGTCGACG
|
GGCCGTTGGT
|
GATGCACCTG
|
|
|
|
1251
|
TCCAAGCTGG
|
ACATCACCAA
|
CCACAACGAG
|
GACTACACCG
|
TGGTGGAGCA
|
|
|
|
|
AGGTTCGACC
|
TGTAGTGGTT
|
GGTGTTGCTC
|
CTGATGTGGC
|
ACCACCTCGT
|
|
|
|
BamHI HindIII
|
|
|
|
1301
|
GTACGAGCAC
|
GCCGAGGCCC
|
GCCACTCCGG
|
|
TCCAAGCTTC
|
|
|
|
|
CATGCTCGTG
|
CGGCTCCGGG
|
CGGTGAGGCC
|
|
AGGTTCGAAG
|
|
EcoRI EcoRV SalI XhoI XbaI SpeI ApaI
|
|
1351
|
TGCAGGAATT
|
CGATATCGTC
|
GACAGATCTC
|
TCGAGTCTAG
|
AACTAGTGGG
|
|
|
ACGTCCTTAA
|
GCTATAGCAG
|
CTGTCTAGAG
|
AGCTCAGATC
|
TTGATCACCC
|
pCMV-N-DsRed中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-DsRed)包括：
|
AclI
|
AflII
|
AgeI
|
AscI
|
AsiSI
|
BaeI
|
|
BcgI
|
BlpI
|
BmgBI
|
Bpu10I
|
BsiWI
|
BsmBI
|
|
BspQI
|
BssHII
|
BstXI
|
BstZ17I
|
EarI
|
EcoNI
|
|
NruI
|
PmeI
|
PmlI
|
PpuMI
|
PshAI
|
PspXI
|
|
SapI
|
ScaI
|
SgrAI
|
SmaI
|
SrfI
|
SwaI
|
|
XcmI
|
XmaI
|
XmnI
|
|
pCMV-N-DsRed中的单酶切位点（Restriction enzymes that cut pCMV-N-DsRed once）包括：
|
NdeI
|
CA`TA,TG
|
240
|
|
PspOMI
|
G`GGCC,C
|
1398
|
|
SnaBI
|
TAC|GTA
|
346
|
|
ApaI
|
G,GGCC`C
|
1398
|
|
CspCI
|
,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN`
|
380
|
|
PvuI
|
CG,AT`CG
|
1478
|
|
NheI
|
G`CTAG,C
|
597
|
|
BclI
|
T`GATC,A
|
1634
|
|
BmtI
|
G,CTAG`C
|
597
|
|
MfeI
|
`AATT,G
|
1727
|
|
SacI
|
G,AGCT`C
|
651
|
|
HpaI
|
GTT|AAC
|
1740
|
|
Eco53kI
|
GAG|CTC
|
653
|
|
BtsI
|
GCAGTG,NN`
|
1814
|
|
BstEII
|
G`GTNAC,C
|
803
|
|
MluI
|
A`CGCG,T
|
1863
|
|
AhdI
|
GACNN,N`NNGTC
|
841
|
|
SfiI
|
GGCCN,NNN`NGGCC
|
2749
|
|
AfeI
|
AGC|GCT
|
945
|
|
ClaI
|
AT`CG,AT
|
2873
|
|
SbfI
|
CC,TGCA`GG
|
999
|
|
BspDI
|
AT`CG,AT
|
2873
|
|
BbsI
|
GAAGACNN`NNNN,
|
1083
|
|
EagI
|
C`GGCC,G
|
2939
|
|
BsrGI
|
T`GTAC,A
|
1201
|
|
KasI
|
G`GCGC,C
|
3032
|
|
PflMI
|
CCAN,NNN`NTGG
|
1241
|
|
PluTI
|
G,GCGC`C
|
3032
|
|
AleI
|
CACNN|NNGTG
|
1290
|
|
NarI
|
GG`CG,CC
|
3033
|
|
BamHI
|
G`GATC,C
|
1338
|
|
SfoI
|
GGC|GCC
|
3034
|
|
HindIII
|
A`AGCT,T
|
1344
|
|
MscI
|
TGG|CCA
|
3115
|
|
EcoRI
|
G`AATT,C
|
1356
|
|
PflFI
|
GACN`N,NGTC
|
3151
|
|
EcoRV
|
GAT|ATC
|
1364
|
|
Tth111I
|
GACN`N,NGTC
|
3151
|
|
SalI
|
G`TCGA,C
|
1368
|
|
BsrDI
|
GCAATG,NN`
|
3264
|
|
AccI
|
GT`MK,AC
|
1369
|
|
RsrII
|
CG`GWC,CG
|
3549
|
|
PaeR7I
|
C`TCGA,G
|
1380
|
|
BstBI
|
TT`CG,AA
|
3715
|
|
XhoI
|
C`TCGA,G
|
1380
|
|
BsaI
|
GGTCTCN`NNNN,
|
4022
|
|
XbaI
|
T`CTAG,A
|
1386
|
|
ApaLI
|
G`TGCA,C
|
4637
|
|
SpeI
|
A`CTAG,T
|
1392
|
|
PciI
|
A`CATG,T
|
4951
|
pCMV-N-DsRed质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
N-DsRed primer (1284-1303): 5′- TACACCGTGGTGGAGCAGTA -3′
T7 primer (1447-1468): 5′- GTAATACGACTCACTATAGGGC -3′
pCMV-N-DsRed的全序列信息：D2705 pCMV-N-DsRed-seq.txt
pCMV-N-DsRed质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。
图1. pCMV-N-DsRed质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片，右侧为荧光照片。
包装清单：
|
产品编号
|
产品名称
|
包装
|
|
D2705-1μg
|
pCMV-N-DsRed (红色荧光蛋白)
|
1μg
|
|
D2705-100μg
|
pCMV-N-DsRed (红色荧光蛋白)
|
100μg
|
|
—
|
说明书
|
1份
|
保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
