Rat IL-6 ELISA Kit

      碧云天的Rat IL-6 ELISA Kit (Rat Interleukin-6 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即大鼠白细胞介素6酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测大鼠血清、血浆、细胞或组织裂解液、或细胞培养上清液中的IL-6的ELISA试剂盒。
      本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为67pg/ml，与GDNF、GM-CSF、IFN-γ、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-10、PDGF-BB、TNF-α、人IL-6、小鼠IL-6均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
      IL-6即白细胞介素-6(简称白介6)，是一种多功能、呈α螺旋、易于磷酸化和糖基化的细胞因子，分子量为22-28KD。IL-6在免疫反应、炎症、血细胞生成、骨代谢、细胞增殖、生长、存活和分化、以及肿瘤等疾病的发生发展过程中有重要作用。
      IL-6的受体是细胞表面的IL-6Rα和gp130亚基组成的异二聚体。IL-6与IL-6Rα结合后引发IL-6Rα与gp130的二聚化，从而激活下游的信号通路，主要包括JAK/STAT信号通路、Ras信号通路以及PI3K信号通路。IL-6Rα和gp130组成了IL-6的受体复合物，而gp130也是CLC、CNTF、CT-1、IL-11、IL-27、LIF、OSM等的受体复合物的组分。IL-6的信号通路图见图1。

图1. IL-6的信号通路示意图。

      本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中靶蛋白的的浓度，其原理见图2。靶蛋白特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的靶蛋白会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗靶蛋白抗体后，生物素化抗靶蛋白抗体与靶蛋白结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin(HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。靶蛋白浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中靶蛋白浓度。

图2. 双抗体夹心ELISA原理图。

      一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

保存条件：
      除标准品外，4℃保存6个月内有效。标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效。注意TMB溶液避光保存。
注意事项：
      由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
      洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
      为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
      TMB对人体有刺激性，请注意适当防护。
      如果发现TMB辣根过氧化物酶显色液出现混浊或颜色变成蓝色，应该停止使用。
      加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
      不宜混用不同批号的试剂盒组份，每批次试剂盒均经过独立测试。
      充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
      本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
      洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
      检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
      加样过程中须避免气泡的产生。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。