大鼠白细胞介素6(IL-6)ELISA试剂盒

概述

规格

48孔配置 / 96孔配置

保存条件

2-8℃避光保存，避免反复冻融

有效期

通常为6-12个月（详见包装标签）

适用范围

检测样本类型：大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清液、尿液、胸腹水、脑脊液等

注：仅限于科研用途，不可用于临床诊断

实验原理（双抗体夹心法）

将纯化的大鼠IL-6抗体预包被于酶标板（固相抗体）

加入待测样本或标准品，其中IL-6与固相抗体结合

加入HRP标记的检测抗体，形成 抗体-抗原-酶标抗体复合物

洗涤后加入底物TMB，经HRP催化产生蓝色反应产物，加酸终止后转黄色

在450 nm波长下测定OD值，OD值与样本中IL-6含量呈正比

关键试剂盒组成 

| 组分 | 48孔配置 | 96孔配置 |

| 预包被酶标板 | 1×48孔 | 1×96孔 |

| 标准品（冻干粉） | 1支 | 1支 |

| HRP标记检测抗体 | 1支 | 1支 |

| TMB显色液 | 3 mL | 6 mL |

| 终止液 | 3 mL | 6 mL |

| 浓缩洗涤液（20×） | 15 mL | 30 mL |

| 封板膜 | 2张 | 2张 |

操作步骤（精简版）

标准品稀释：用标准品稀释液复溶至 120 pg/mL，梯度稀释为：120、60、30、15、7.5、0 pg/mL

加样：

每孔加入50-100 μL样本或标准品

37℃孵育60-120分钟

洗涤：洗板5次，拍干

加酶标抗体：加入HRP标记抗体，37℃孵育30-60分钟

洗涤：重复步骤3

显色：每孔加TMB 90 μL，避光反应15分钟

终止：加入终止液50 μL/孔

检测：450 nm波长读取OD值（参考波长630 nm）

结果计算

绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标

根据样本OD值从曲线方程计算IL-6浓度

注意事项

样本预处理：

血清/血浆：采集后30分钟内离心分离

细胞培养液：离心去除沉淀

组织匀浆：低温离心取上清

重复检测：建议每样本做双复孔

灵敏度：通常为 0.1-5 pg/mL（不同批次可能差异）

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