牛诺如病毒PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒采用特异性RT-PCR检测原理，适配牛诺如病毒RNA核酸检测，可对牛粪便、肛拭子、肠道组织等样本中的病毒进行精准筛查。试剂盒配套优化的反转录与扩增一体化体系，有效提升RNA样本检测稳定性，避免核酸降解导致的假阴性结果。可快速诊断牛诺如病毒引发的急性胃肠炎、腹泻疫情，适用于牛群消化道疫病暴发溯源、日常防疫筛查及畜禽肠道病毒流行病学调查。

基础原理：

一步法荧光 RT-PCR，引物探针靶向牛诺如病毒 VP1 衣壳基因，RNA 反转录与扩增同步进行，荧光信号直接判定阳性样本。

巢式 RT-PCR 分步扩增诺如病毒保守区与牛源特异性片段，凝胶电泳条带区分人、猪、牛不同宿主诺如病毒。

染料法实时 RT-PCR，扩增病毒 RNA 依赖 RNA 聚合酶基因，熔解曲线特异性峰鉴别牛诺如病毒，减少非特异性扩增误判。

‌操作步骤‌：

样本处理（样本处理区）

推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。

试剂配制（试剂准备区）

反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。

PCR扩增（核酸扩增区）

循环参数：

预变性：95℃ 2min（1循环）；

扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。

结果分析

阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；

阴性：无Ct值或曲线平直；

可疑：40<Ct≤45，需复测确认。

质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。

‌注意事项‌：

所有试剂避免反复冻融，可分装小体积冻存；融化后冰上放置不超过 2 h，酶失活会直接导致无扩增条带

阳性质粒拷贝数极高，开盖全程在生物安全柜操作，防止气溶胶污染实验室

所有耗材必须无核酸酶，枪头一次性使用；实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃

试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用

仅限科研检测，严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景

土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸，减少抑制剂干扰

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