rPNGase F 糖苷酶 质谱级/肽N-糖苷酶F/PNGase F糖苷内切酶

北京生夏蛋白技术有限公司/北京华利世
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质谱级PNGase F 糖苷酶特异性水解复杂的糖蛋白的寡糖和高甘露糖链接的天冬酰胺，酶切掉天冬氨酸脱氨基的天冬酰胺,保留低聚糖蛋白

完好无损。但是不会去除低聚糖含有α(1→3)核心岩藻糖。

物理形态: 20mM Tris-HCl(pH 7.5 at 25°C), 50mM NaCl and 5mM EDTA溶液

分子量: 35kDa.

浓度：10000 U/ml （1U=65 NEB units）

储存条件：存储在4-10℃冰箱，禁止-20℃以下低温冷冻

保质期：4℃保质期24个月

pH 范围: PH6.0–10.0 有活性， PH=8.6具有最佳活性

适用范围：特异性酶切糖蛋白的 N端寡糖

溶液内酶解SOP:

变性酶切：

1.在 50mM 碳酸氢铵 (pH 7.8)溶液中加入20ug变性的糖蛋白，调整体积至 18µl.

2.加 2µl rPNGase F溶液

3. 37°C条件下， 保温 1–2 小时酶切糖蛋白样品

Native酶切：

1. 在 50mM 碳酸氢铵 (pH 7.8)溶液中加入50ug糖蛋白，调整体积至 50ul.

2.加 1ul rPNGase F溶液

3. 37°C条件下， 保温 1–2 小时酶切糖蛋白样品

质量控制｜Quality Control

纯度： HPLC检测分析杂质蛋白峰强度，rPNGase F峰峰高比大于99.5%

活性:40000unit/min/mg；单位定义：rPNGase F蛋苷酶每分钟酶切1.0 umole 变性的Ribonuclease B的量，反应条件：37℃，PH7.5，LC-MS分析

特异性质谱分析：变性的RNase B 使用rPNGase F糖苷酶在37℃酶切60min后，试用LC-MS分析，RNase B去除N-聚糖＞98%