人肺微血管内皮细胞 新品

细胞简介：

人肺微血管内皮细胞（HPMEC）分离自肺组织，是构成肺微血管内壁的单层细胞，呈梭形或多角形，形成单层后呈鹅卵石样或铺路石样排列。这些细胞在肺气体交换、调节液体和可溶物在血液与肺间质之间的流动中发挥关键作用，同时参与炎症反应、伤口愈合等生理过程。HPMEC在体外培养周期有限，建议使用专用培养基和优化操作以维持最佳状态。

产品信息:

产品名称 人肺微血管内皮细

组织来源 肺组织

默认种属 人，其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25

细胞简介 人肺微血管内皮细胞分离自肺组织；肺是机体的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆盖于心之上。肺有分叶，左二右三，共五叶。肺经肺系（指气管、支气管等）与喉、鼻相连，故称喉为肺之门户，鼻为肺之外窍。微血管内皮细胞密切参与包括再生、发育、伤口愈合等一系列生理及炎症反应。细胞呈梭形或多角形，形成单层后呈鹅卵石样或铺路石样排列。肺微血管内皮细胞构成半选择性屏障，该屏障对于肺气体交换，调节液体和可溶物在血液与肺间质之间的流动具有重要意义。

方法简介 实验室分离的人肺微血管内皮细胞采用组织贴块法并结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

质量检测 实验室分离的人肺微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息

自备试剂： 0.25%胰蛋白酶、多聚-L-赖氨酸溶液（1×）或多聚-L-赖氨酸溶液（10×）或明胶包被液（1 mg/mL） [PB180535] 、PBS [PB180327] 、完全培养基 [CM-H001]

包被条件： PLL（0.1 mg/mL）或明胶（0.1%）

培养基： 人肺微血管内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等) 

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 内皮细胞样

传代比例： 1:2

传代特性： 可传2-3代

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人肺微血管内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

细胞培养步骤：

1. 细胞复苏

‌运输与接收‌：细胞以液氮冻存形式运输，收到后立即用75%酒精喷洒消毒细胞瓶，置于超净台内无菌操作。

‌复苏操作‌：将细胞瓶放入37℃、5% CO₂培养箱中静置3-4小时稳定状态，显微镜下观察细胞形态和密度，记录初始状态（建议40x、100x、200x各拍一张照片）。

2. 细胞传代

‌传代时机‌：当细胞密度达80%汇合度时进行传代。

‌操作步骤‌：

弃去旧培养基，用无钙镁PBS润洗细胞1-2次。

加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落。

加入5 mL完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞完全脱落。

离心（1000 RPM，5分钟），弃上清，用1-2 mL培养基重悬。

按1:2比例分瓶传代（如T25瓶分至两个T25瓶），补充新鲜培养基至5 mL。

‌换液频率‌：每2-3天换液一次。

3. 细胞冻存

‌冻存液‌：使用无血清冻存液。

‌冻存步骤‌：细胞传代后，用胰蛋白酶消化并离心，重悬于冻存液，缓慢降温至-80℃，最终转入液氮长期保存。

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产品注意事项：

无菌操作是生命线‌：所有操作必须在‌生物安全柜内‌严格无菌进行，使用专用试剂和耗材，防止交叉污染。

‌消化是关键步骤‌：

‌控制时间‌：使用胰蛋白酶或TrypLE™ Express消化时，‌严格控制在1-2分钟内‌。显微镜下观察到细胞变圆、边缘松动即可终止，‌避免过度消化‌导致细胞损伤。

‌消化液选择‌：部分供应商推荐使用‌0.25%胰蛋白酶‌，也有使用‌TrypLE™ Express‌或‌0.25% EDTA胰酶‌的，可根据实验室条件和细胞反应选择。

‌培养基与生长因子‌：

‌基础培养基‌：推荐使用‌人肺微血管内皮细胞专用培养基‌（如EGM-2 MV BulletKit）。若使用DMEM/F12等基础培养基，需补充‌10-20%胎牛血清（FBS）‌及抗生素（如青霉素/链霉素）。

‌生长因子‌：为促进生长，可添加‌VEGF、FGF‌等内皮细胞生长因子。‌传代后可尝试对比培养‌（一瓶用原装完全培养基，一瓶用自配培养基）。

‌细胞密度与传代‌：

‌最佳传代密度‌：建议在细胞汇合度达‌70%-80%‌时进行传代，避免过度生长导致细胞状态下降。

‌生长不均处理‌：若细胞生长不均，成岛状分布，可将细胞消化后重新打散，加入新鲜培养基培养]^。

‌污染监测与处理‌：

‌定期检查‌：定期观察细胞有无支原体、细菌等污染迹象。

‌污染处理‌：若发现污染，需根据污染程度决定。轻度污染可尝试用含高浓度抗生素的培养液反复清洗，但严重污染时建议弃置细胞。