人肺微血管内皮细胞 新品

人肺微血管内皮细胞

产品信息：

细胞简介：

人肺微血管内皮细胞分离自肺组织；肺是机体的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆盖于心之上。肺

有分叶，左二右三，共五叶。肺经肺系（指气管、支气管等）与喉、鼻相连，故称喉为肺之门户，鼻为肺之外

窍。微血管内皮细胞密切参与包括再生、发育、伤口愈合等一系列生理及炎症反应。细胞呈梭形或多角形，形

成单层后呈鹅卵石样或铺路石样排列。肺微血管内皮细胞构成半选择性屏障，该屏障对于肺气体交换，调节液

体和可溶物在血液与肺间质之间的流动具有重要意义。

方法简介 实验室分离的人肺微血管内皮细胞采用组织贴块法并结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细

胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

质量检测 实验室分离的人肺微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV

、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

自备试剂： 0.25%胰蛋白酶、多聚-L-赖氨酸溶液（1×）或多聚-L-赖氨酸溶液（10×）或明胶包被液（1 mg/

mL） 、PBS 、完全培养基

包被条件： PLL（0.1 mg/mL）或明胶（0.1%）

培养基：

人肺微血管内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 内皮细胞样

传代比例： 1:2

传代特性： 可传2-3代

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人肺微血管内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此

保证该细胞的最佳培养状态。

细胞培养步骤

1. 培养条件准备

‌培养基‌：推荐使用配套完全培养基（如CM-H001），或自配：‌高糖DMEM + 10% FBS + 1%双抗‌

‌包被处理‌：建议使用 ‌0.1 mg/mL多聚-L-赖氨酸（PLL）或0.1%明胶‌ 预包被培养瓶，提升贴壁效率

‌环境设置‌：37℃恒温培养箱，‌95%空气 + 5% CO₂‌，湿度70%-80%

2. 收到细胞后的处理

‌常温运输细胞‌：立即放入培养箱静置 ‌3–4小时‌ 稳定状态，再进行换液或传代

‌干冰运输冻存细胞‌：迅速转入 ‌-80℃冰箱过夜后转液氮保存‌，或直接复苏

‌显微镜检查‌：观察细胞贴壁情况、有无漂浮碎片或污染，前3天拍照留存作为售后依据

细胞冻存与复苏：

冻存操作

按传代方法收集生长状态良好的细胞

离心后弃上清，用 ‌冻存液重悬细胞‌，推荐配方：

‌90%完全培养基 + 10% DMSO‌

或 ‌50%培养基 + 40% FBS + 10% DMSO‌

调整细胞密度为 ‌1×10⁶ 至 1×10⁷ 个活细胞/mL‌

分装至冻存管（每管1 mL），使用程序降温盒：

‌4℃ 10 min → -20℃ 2 h → -80℃过夜 → 液氮长期保存‌

复苏操作

从液氮中取出冻存管，‌37℃水浴快速摇晃解冻（1分钟内完成）‌

转移至含 ‌9 mL预热完全培养基‌ 的离心管中，‌1000–1200 rpm离心5分钟‌

弃上清，用1–2 mL新鲜培养基重悬细胞

接种至预包被的T25瓶中，补足培养基至5–8 mL，放入培养箱培养

‌24小时后换液‌，去除未贴壁的死细胞

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