大鼠FGF-2/FGF basicelisa试剂盒 新品

大鼠FGF-2/FGF basicelisa试剂盒

产品简介:

大鼠FGF-2/FGF basic ELISA试剂盒专门用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液及细胞培养上清等生物样本中的成纤维细胞生长因子-2（FGF-2，又称bFGF）含量，采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA），具有高灵敏度和高特异性。

核心原理

双抗体夹心法：微孔板预先包被抗大鼠FGF-2特异性抗体，样本中的FGF-2与抗体结合后，加入生物素标记的检测抗体，再与HRP标记的链霉亲和素形成免疫复合物。

显色反应：加入TMB底物，HRP催化产生蓝色，反应终止后变为黄色。颜色深浅与样本中FGF-2浓度成正相关。

浓度计算：450 nm波长处测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算FGF-2浓度。

主要特点

检测范围广：常见检测范围为15.625-1000 pg/mL，灵敏度可达9.375 pg/mL或更高。

高特异性：与其他结构类似物无明显交叉反应，准确检测目标蛋白。

重复性好：板内和板间变异系数均小于10%，数据可靠。

应用领域广泛：适用于发育生物学、细胞增殖与分化、血管生成、创伤修复及肿瘤研究等基础科研领域。

操作流程简要

样本准备：血清、血浆、组织匀浆或细胞上清等样本适当处理并稀释，避免反复冻融。

加样：设空白孔、标准品孔和样本孔，分别加入对应溶液。

温育：37℃孵育30-60分钟。

洗板：弃去液体，洗涤3-5次。

加检测抗体：每孔加入HRP标记的检测抗体，37℃孵育30分钟。

洗板：同上。

显色与终止：加入TMB显色底物，37℃避光孵育15分钟，再加入终止液。

读数：450 nm测定OD值，依据标准曲线计算浓度。

注意事项

避免样本反复冻融和溶血，不可检测含的样品。

试剂盒组分需按说明书规范使用和保存。

严格遵守操作步骤及仪器校准，确保结果准确。

应用与服务

该试剂盒广泛应用于生物医学研究领域，如机制研究、疾病标志物检测等。部分厂家提供免费代测服务和专业技术支持，方便用户获得准确可靠的实验结果。

操作要点：

需严格遵守试剂盒说明书操作，建议做复孔及标准曲线。

洗涤过程至关重要，洗涤不充分会影响结果准确性。

所有试剂使用前需恢复至室温，避免批号混用。

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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。

注意事项

试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。

实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。

充分混匀对实验结果至关重要。

试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。

显色液需避光保存，终止液为2M硫酸，操作时需安全防护。