小鼠核因子κB受体活化因子（RANK）elisa试剂盒 新品

小鼠核因子κB受体活化因子（RANK）elisa试剂盒

产品简介:

产品特点

高灵敏度：灵敏度通常在0.1至0.03 ng/mL之间。

高特异性：能特异性识别小鼠RANK，与结构类似物无交叉反应。

宽检测范围：检测范围一般为0.312-10 ng/mL，特殊需求可定制。

重复性好：板内变异系数均<10%，板间变异系数均<15%。

适用样本

血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆、细胞裂解液等。

检测原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法。微孔板预包被抗RANK抗体，加入标准品和样本后，再加入生物素标记的抗RANK抗体和酶标记的链霉亲和素，形成免疫复合物。加入显色底物TMB，颜色深浅与RANK浓度正相关，通过酶标仪测定吸光度，计算浓度。

试剂盒组成

酶标板、标准品、生物素化抗体、酶结合物、底物溶液、终止液、洗涤液等。

操作步骤

准备试剂和样本：平衡试剂至室温，按说明书稀释样本。

加样：加入标准品和样本至微孔板，温育。

洗涤：洗板去除未结合物质。

加抗体和酶结合物：依次加入生物素化抗体和酶结合物，温育后洗涤。

显色和终止：加入底物溶液显色，再加入终止液终止反应。

测定和计算：用酶标仪测定吸光度，绘制标准曲线，计算样本中RANK浓度。

注意事项

保存条件：2-8℃保存，避免冻结，有效期一般为6个月。

操作规范：严格按说明书操作，避免交叉污染。

安全防护：避免直接接触显色剂和终止液，实验中注意安全。

如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。

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注意事项

科研用途：仅供科研实验使用，不可用于临床诊断。

操作规范：严格按照说明书操作，避免交叉污染，确保实验结果准确。