人脐静脉内皮细胞（永生化）；HUVEC-SV40T+RFP 新品

人脐静脉内皮细胞（永生化）；HUVEC-SV40T+RFP

商品属性

英文名称：Human Umbilical Vein Endothelial Cells (Immortalized, SV40T+RFP)

简称：HUVEC-SV40T+RFP

细胞特性

来源：人脐带组织，经SV40大T抗原基因转导实现永生化，并携带红色荧光蛋白（RFP）标记。

形态：内皮细胞样，贴壁生长。

增殖能力：可传代50-60次，在半固体培养基中形成克隆，无致瘤性（免疫抑制小鼠模型验证）。

应用：内皮功能研究、药物筛选、基因表达分析等。

产品规格

包装形式：

冻存管：1 mL/管，细胞数≥5×10^5 cells/mL。

T25培养瓶：复苏后活细胞（常温运输）。

质检标准：

无菌检测：无HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌及真菌污染。

标志物验证：通过α-SMA和Desmin免疫荧光染色鉴定。

运输与保存

运输条件：

冻存管：干冰运输，接收后立即转入液氮或-80℃保存，或直接复苏。

T25瓶：常温运输，收到后需37℃静置2-3小时再处理。

保存建议：长期保存于液氮（-196℃），避免反复冻融。

细胞复苏与培养

复苏步骤

解冻：将冻存管迅速置于37℃水浴，至残留少量冰屑时用75%酒精消毒管壁。

离心：转移内容物至15 mL离心管，加入预温的RPMI-1640培养基4-5 mL，1500 rpm离心10分钟。

重悬：弃上清，用完全培养基（如DMEM+10%胎牛血清）重悬细胞，接种至明胶包被的培养瓶。

培养条件

培养基：推荐DMEM+10%胎牛血清+50 μg/mL卡那霉素（或专用内皮细胞培养基）。

包被方法：培养瓶用0.5%明胶溶液（去离子水配制）37℃包被2小时或过夜。

传代比例：1:2至1:3，消化时间约2-3分钟（0.25%胰酶+EDTA）。

换液频率：每周2次，细胞汇合度达70-80%时需传代。

注意事项

复苏后首次换液需在24小时内完成，以去除残留冻存保护剂。

永生化细胞需定期检测SV40T抗原表达稳定性。

RFP标记可用于荧光显微镜或流式细胞术追踪，但长期培养后建议验证荧光强度。
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