HUVEC+RFP人脐静脉内皮细胞永生化+RFP

HUVEC+RFP人脐静脉内皮细胞永生化+RFP

 细胞特性:

该细胞来源于人静脉内皮，可在半固体培养基中形成克隆，在免疫抑制小鼠中不能形成肿瘤。

该细胞通过慢病毒转染的方式携带RFP基因。

1） 来源：人脐带组织

2） 形态：内皮细胞样 贴壁生长

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

 1. 细胞系来源与背景:

母细胞：原代HUVEC（从新生儿脐静脉分离）。

永生化方法：通常通过hTERT（端粒酶逆转录酶）或SV40大T抗原转染实现永生化，避免原代细胞的衰老限制。

荧光标记：整合**RFP（如tdTomato、mCherry）**基因，便于活细胞成像和追踪。

应用：

血管生成研究（如Matrigel试管形成实验）。

肿瘤-内皮细胞互作（共培养模型）。

药物筛选（抗血管生成药物如贝伐珠单抗）。

 培养条件:

基础培养基

添加生长因子

培养环境

传代比例

荧光稳定性

  注意事项:

永生化HUVEC仍保持内皮细胞特性（如vWF、CD31阳性），但需定期验证功能（如低密度脂蛋白摄取实验）。

避免过度传代（>P30），以防表型漂移。

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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